[发明专利]一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体公开一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法。所述Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法包括：a、大鼠进行高脂进食8周后，按照15mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液；b、继续高脂进食5天后，按照20mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液；c、继续高脂进食1天后，按照25mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液；每次注射前，所述大鼠禁食不禁水16h；三次注射STZ后，在大鼠继续进行高脂进食的第三天、第七天和第十天的空腹血糖≥16.7mmol/L，则Ⅱ型糖尿病大鼠模型建立成功。本发明的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法具有成功率和成活率高、稳定性好以及病理特征明显等优势。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法。

背景技术

糖尿病是世界范围内的公共卫生问题，预计到2045年将影响6.93亿成年人，严重威胁人类健康。目前全世界每11个成年人中就有1个患有糖尿病，其中90％为Ⅱ型糖尿病(T2D)。亚洲是Ⅱ型糖尿病全球流行的主要地区。T2D及其并发症的病因复杂，发病机制不明确，因此建立理想的动物模型对研究T2D及其并发症的发病机制和治疗具有重要意义。

目前，国内外有多种途径和方式来获取或构建T2D动物模型。其中高脂饮食(high-fat diet，HFD)联合链脲佐菌素(streptozocin，STZ)构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型能够模拟人类Ⅱ型糖尿病发病过程，更加接近人类的T2D发病机制。然而传统构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型由于STZ的使用剂量把控难度极大，常会造成超高的动物死亡率。但如果采用低剂量STZ注射，则有会造成动物的成模率低，模型不稳定，模型的病理特征不明显等缺陷。

发明内容

针对现有Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法存在的上述问题，本发明提供一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法，该Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法具有成活率高、稳定性好、病理特征明显以及构建效率高的优势。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法，包括以下步骤：

a、选取健康6周龄雄性SD大鼠，进行高脂自由进食8周后，按照15mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到初次注射STZ大鼠；

b、使所述初次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食5天后，按照20mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到二次注射STZ大鼠；

c、使所述二次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食1天后，按照25mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到三次注射STZ大鼠；

每次进行所述腹腔注射前，所述大鼠禁食不禁水12-16h；

所述三次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食的第三天、第七天和第十天的空腹血糖≥16.7mmol/L，则Ⅱ型糖尿病大鼠模型建立成功。

相对于现有技术，本发明提供的通过高脂饮食联合上述不同剂量、不等时间间隔3次腹腔注射STZ，可成功构建得到Ⅱ型糖尿病大鼠模型。且采用该方法构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的动物死亡率为0(排出其他环境因素的影响)，建模成功率为100％，构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的病理特征典型，模型可长期维持Ⅱ型糖尿病的典型病理特征(构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型在实验观察的第3-24天其血糖浓度均维持在16.7mmol/L以上)，具有极高的模型稳定性。

优选的，步骤a中，所述健康6周龄雄性SD大鼠的体重为180-220g。

优选的，所述高脂自由进食的方法为：给予大鼠充足的高脂饲料，使所述大鼠进行自由进食。

优选的，所述高脂饲料为45kcal％脂肪热量高脂鼠粮，具体可选用Dyets的45kcal％脂肪热量高脂鼠粮，货号为HF45。