[发明专利]环状RNA hsa_circ_0001741的表达载体、重组工程菌及其应用有效
申请号: | 202110984367.1 | 申请日: | 2021-08-25 |
公开(公告)号: | CN113789340B | 公开(公告)日: | 2023-06-13 |
发明(设计)人: | 肖斌;潘小娟;冉玲玉;王永权;李薇;马强;王晓林;黄波;刘煜莹;杨飞飞;张钰莹;任俊伍;梁策 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/113;C12N1/21;C12N15/11;C12Q1/6886;C12Q1/6851;A61K45/00;A61K48/00;A61K31/7088;A61P35/00;C12R1/19 |
代理公司: | 重庆志合专利事务所(普通合伙) 50210 | 代理人: | 胡荣珲 |
地址: | 400042*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 环状 rna hsa_circ_0001741 表达 载体 重组 工程 及其 应用 | ||
本发明提供一种环状RNA hsa_circ_0001741的表达载体,包含连接到环状RNA表达质粒中的环状RNA表达序列;所述环状RNA表达序列为与基因TNPO3的2、3和4号外显子依次连接的核苷酸序列相似度90%以上的脱氧核苷酸序列。hsa_circ_0001741能够有效地抑制ccRCC细胞的迁移和增殖,因此hsa_circ_0001741在作为肾癌转移病人的治疗和预后方面具有广泛的前景。
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及环状RNA hsa_circ_0001741的表达载体、重组工程菌及其应用。
背景技术
肾细胞癌(Renal cell carcinoma,RCC)是常见的恶性肿瘤之一,全球每年大约有35万人被诊断为肾细胞癌WHO根据肿瘤细胞起源及其基因改变等特点将肾细胞癌分为透明细胞癌、乳头状细胞癌、嫌色细胞癌、集合管癌和未分类肾细胞癌等。肾透明细胞癌(clearcell Renal Cell Carcinoma,ccRCC)是临床上最常见的肾脏恶性肿瘤,其中约70%的肾细胞癌为肾透明细胞癌(ccRCC)。手术切除是目前治疗肾癌有效的方法,但仍有近1/3的肾癌患者在确诊时已发生远处转移,20%~40%手术后会出现复发并发展为转移性肾癌。转移性肾癌对传统的放、化疗及内分泌治疗均不敏感,患者预后差。
环状RNA(Circular RNA)是非编码RNA的一种,是一类首尾共价结合的、既无5’端帽子结构也无3’端多聚腺嘌呤尾的环状结构。随着高通量测序技术逐渐被运用到生命科学与医学研究中,越来越多的环状RNA被发现,其在疾病特别是恶性肿瘤的发病中发挥重要作用,是潜在的治疗新靶点和诊断标志物。目前已有部分研究者关注环状RNA在ccRCC中异常表达,及其与ccRCC发生发展和转移的关系,提示它们在ccRCC的诊断、预后和治疗中具有广阔的应用前景。
发明内容
一种环状RNA hsa_circ_0001741位于7号染色体(chr7):128655032–128658211,其亲本基因为线性TNPO3基因,有报道hsa_circ_0001741与卵巢癌耐药性相关。本发明在研究中发现hsa_circ_0001741在ccRCC表达下降,且验证了hsa_circ_0001741在ccRCC发生发展中的作用,并进一步提供了一种制备新型ccRCC治疗药物的构思。
本发明首先提供了一种环状RNA hsa_circ_0001741的表达载体,其包含连接到环状RNA表达质粒中的环状RNA表达序列;所述环状RNA表达序列为与基因TNPO3的2、3和4号外显子依次连接的核苷酸序列相似度90%以上的脱氧核苷酸序列。
在根据本发明的一个实施方案中,所述环状RNA表达序列为SEQ ID NO:1
GTTCATGCATGGGAGATCTCAGACCAGTTGTTACAGATCCGGCAGGATGTGGAGTCATGCTATTTTGCTGCACAGACCATGAAAATGAAGATTCAGACCTCATTTTATGAGCTCCCCACAGACTCTCATGCCTCTTTACGGGACTCATTGCTAACCCATATCCAGAACTTGAAAGACTTGTCACCTGTTATTGTAACGCAGCTGGCTTTAGCAATAGCAGATCTTGCCCTACAGATGCCTTCCTGGAAGGGATGTGTGCAAACACTGGTGGAAAAATACAGCAATGATGTGACTTCTTTGCCTTTTTTGCTGGAGATCCTTACAGTGTTACCTGAAGAAGTACATAGTCGTTCCTTACGAATTGGAGCTAATCGGCGCACAGAAATTATAGAAGATTTGGCCTTCTACTCTAGTACAGTAGTATCTCTATTG。
在根据本发明的一个实施方案中,所述环状RNA表达质粒选自pCD-ciR、pCD2.1-ciR、pLC5-ciR、pLCDH-ciR、pLO-ciR、pCE-RB-Mam、pcDNA3.1(+)CircRNA Mini Vector等环状RNA过表达载体中的任一种。
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