[发明专利]一种工业制备高纯麦角硫因的方法

说明书

本发明提供了一种工业制备高纯麦角硫因的方法，包括：将菌丝体热水处理后固液分离，收集得到含有麦角硫因的料液；将含有麦角硫因的料液进行真空浓缩，过滤，超滤，脱色，解吸，浓缩；将麦角硫因解吸浓缩液进行色谱纯化，收集目标峰并浓缩至干，水溶解后得到麦角硫因样液；将麦角硫因样液过离子交换树脂脱盐脱色，收集得到麦角硫因脱盐浓缩液；将麦角硫因脱盐浓缩液粗结晶和重结晶，烘干，得到高纯麦角硫因晶体粉末。本发明从糙皮侧耳CGMCCNo.23071的菌丝体中大量制备高纯麦角硫因，确保麦角硫因产品质量，尤其适用于麦角硫因的规模化生产，从而满足该产品在食品、化妆品、保健、医药等领域需求。

技术领域

本发明属于生化制品、食品及医药相关领域，涉及一种工业制备高纯麦角硫因的方法。

背景技术

麦角硫因(L-Ergothioneine，EGT)是一种稀有天然手性氨基酸类强抗氧化剂，至今唯一被发现的天然2-硫代咪唑氨基酸(2-thio-imidazole)，生理pH环境下主要以硫酮的形式存在，硫羰基的稳定性高于巯基，因此EGT不会自发氧化，并具有良好的pH稳定性和热稳定性。麦角硫因具有清除自由基、解毒、维持DNA生长、抗辐射、抗衰老等功能，是一种独特的细胞生理保护剂；其次转运体ETT的存在使EGT成为唯一可以在细胞间运输的抗氧化剂，可以起到保护神经系统、抑制发育性缺陷、保护肝脏等作用。鉴于EGT的生理活性，使其在食品、化妆品、医药等领域具有广泛的应用前景。

EGT的制备方法有三种：化学合成法、天然生物提取法和生物合成法。EGT是手性氨基酸，要用化学法合成左旋的EGT十分困难，几种合成方法都因局部或全部外消旋而没有达到预期的效果。OXIS公司首先研制出了商业化化学合成EGT的方法，但合成EGT的原料昂贵，合成的成本高。从天然生物中提取EGT，存在原料中的EGT含量低，杂质多，提取成本高及风俗禁忌等问题，就目前所知，在动物组织猪血中的EGT含量较高，也仅达到60mg/L。大型真菌子实体中EGT的含量较高，但受原料的成本限制，提取得到的EGT价格居高不下。与化学合成法和提取法相比，利用大型食用真菌发酵合成EGT不仅生产成本低，原料来源广，且不存在风俗禁忌问题，更重要的是能够保证EGT产品的安全性，是目前EGT合成技术的主流方向。

大型真菌深层发酵合成的麦角硫因绝大部分积累于菌丝体内，必须具备从菌丝体中分离纯化制备麦角硫因的技术，菌丝体处理液具有色值深、菌丝体释放产物复杂、EGT质量占比低的特点，一种稳定可持续的工业制备高纯麦角硫因的工艺技术极为迫切。姜文侠等建立的菌丝体中提取麦角硫因方法为菌丝体热水浸提、浸提液超滤、超滤液干燥或浓缩后乙腈溶液溶解超声、HILIC柱纯化、收集含EGT峰组分，浓缩干燥得到的麦角硫因纯度96-99％，回收率28-47％(CN104774182A8)。上述纯化方法中采用乙腈溶液为流动相，具有毒性的乙腈在化妆品、食品、医药等领域受到严格限制，其次HILIC柱直接纯化浸提超滤浓缩液，大量的色素及杂质会造成HILIC填料的污染，严重影响HILIC柱的使用寿命，浸提超滤浓缩液的直接进行HILIC柱纯化降低了HILIC柱的单批次处理量，综合处理批次增多，有机溶剂使用量增加，成本骤增；最后HILIC纯化后的干燥样品颜色不一，质量不稳定；综上该方法得到的最终样品限制了麦角硫因产品在主要领域的应用。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种工业制备高纯麦角硫因的方法，从菌丝体中大量制备高纯麦角硫因，确保麦角硫因产品质量，尤其适用于麦角硫因的规模化生产，从而满足该产品在食品、化妆品、保健、医药等领域需求。

为了实现上述技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种工业制备高纯麦角硫因的方法，包括：

1)菌丝体热水处理后固液分离，收集得到含有麦角硫因的料液；

2)将含有麦角硫因的料液进行真空浓缩，调节pH 8-10，过滤得到麦角硫因浓缩液；

3)将麦角硫因浓缩液分别采用陶瓷膜微滤澄清和中空纤维膜超滤，得到麦角硫因超滤液；