[发明专利]从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法及胶原蛋白

权利要求书

1.一种从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

获取猪皮并进行脱脂处理；

制备成均质脱脂猪皮之后用蛋白提取液除去水溶性杂蛋白；

用胃蛋白酶和盐酸/乙酸提取猪皮中的胶原蛋白，获取提取液；

对所述提取液进行中性低温盐析，获取沉淀；

对所述沉淀进行精制处理之后，获得去端肽胶原蛋白。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述猪皮来源于SPF级动物；所述猪皮来源于三月龄的猪。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脱脂处理包括：

配制脱脂剂；

将所述猪皮和脱脂剂按照固液体积比1：10进行混合之后搅拌脱脂；

去上清。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述脱脂剂选用0.1mol/L的NaOH、0.6％的SDS或2％的Na₂CO₃；脱脂的搅拌时间为2～8h。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，进行所述脱脂处理之前，包括：去除所述猪皮表面脂肪，切成边长为毫米尺寸的小块。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，制备所述均质脱脂猪皮用的溶液为磷酸缓冲液或10％的NaCl溶液；所述蛋白提取液为磷酸缓冲液或10％的NaCl溶液。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胃蛋白酶的添加量为所述均质脱脂猪皮质量的1/100～1/20质量比；所述盐酸/乙酸的使用浓度为0.5mol/L，添加量为所述均质脱脂猪皮体积的10倍体积比；所述胶原蛋白的提取温度为4℃，提取时间为24～48h。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述中性低温盐析的过程如下：将所述提取液调整至pH＝7.0,在4℃的条件下静置8h以上。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述精制过程包括以下步骤至少之一：

对所述沉淀进行洗涤，洗涤液选用磷酸缓冲液；

对所述沉淀进行复溶之后，进行超滤分离；所述超滤分离所要求的截流分子量为3kD、10kD或50kD；

对所述沉淀进行复溶之后，进行冷冻干燥。

10.一种胶原蛋白，其特征在于，所述胶原蛋白不含I型胶原蛋白的N端端肽和C端端肽，其采用如权利要求1～9任一项所述的从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法获得。