[发明专利]一种三段式自体脂肪干细胞裂解液丰胸方法

权利要求书

1.一种三段式自体脂肪干细胞裂解液丰胸方法，其特征在于，

包括下列步骤：

S1自体脂肪细胞的采集

a在无菌条件下采集自体脂肪细胞80～100ml，用于采集分离出自体脂肪干细胞；

S2自体脂肪干细胞分离

a移除最上层油脂，并分别移取悬浮的脂肪颗粒和底层细胞沉淀；

b在脂肪颗粒中加入消化酶混合液，室温下以振荡30～38min；通过加入完全培养基终止消化，经过离心后除去上清液，PBS重悬细胞沉淀；

c将底层细胞沉淀用PBS重悬，加入等量红细胞裂解液静置5～15min进行裂解，红细胞充分裂解后，通过离心，丢弃上清液，PBS重悬细胞沉淀；

d将细胞悬液进行合并再通过过滤，分离出原代自体脂肪干细胞；

S3原代自体脂肪干细胞的传代培养

a将原代脂肪自体间充质干细胞接种培养，加入完全培养基；

b换液时间为2天/次，生长周期为5～7天，即可获得P1代脂肪间充质干细胞，按照上述步骤继续传代，至P10代，收集各代的自体脂肪干细胞；

S4自体脂肪干细胞裂解液的制备

a收集的各代自体脂肪干细胞装入冻存管内，立即放入-196℃～-200℃液氨罐内冻存15～20min，再通过电动混匀器强力混匀2～4min；

b反复上述操作至少3次，充分破碎裂解自体脂肪干细胞；

c通过离心装置对上述破碎裂解液进行离心处理，最终上层清液即为制得的自体脂肪干细胞裂解液。

2.根据权利要求1所述的三段式自体脂肪干细胞裂解液丰胸方法，其特征在于，还包括S5，将制得的自体脂肪干细胞裂解液与生长因子、转换因子混合，过来后，取得上层清液为注射液。

3.根据权利要求1所述的三段式自体脂肪干细胞裂解液丰胸方法，其特征在于，还包括S6，根据待丰胸者的乳房形状，在乳房底部、中部和顶部分别选取注射点位。

4.根据权利要求1所述的三段式自体脂肪干细胞裂解液丰胸方法，其特征在于，生长因子包括透明质酸、胰岛素、地塞米松、氨基酸、L-氨酰胺中的任意三种。

5.根据权利要求1所述的三段式自体脂肪干细胞裂解液丰胸方法，其特征在于，所述脂肪为人体脂肪。