[发明专利]一种促进作物生长的芽孢杆菌制剂的制备方法

说明书

本发明属于农用微生物制剂技术领域，特别涉及一种促进作物生长的芽孢杆菌制剂的制备方法。本发明将浒苔加热水解制成浒苔提取液，用以扩增得到含枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的发酵液，所述发酵液经冻干并与适量乳清粉混合后，制得所述促进作物生长的芽孢杆菌制剂。本发明原料易得，制备工艺稳定，制得的促进作物生长的芽孢杆菌制剂可有效促进作物生长，适合推广应用。

技术领域

本发明属于农用微生物制剂技术领域，特别涉及一种促进作物生长的芽孢杆菌制剂的制备方法。

背景技术

植物促生菌是一类主要存在于植物根系的微生物种群。不同的植物促生菌发挥着不同的促植物生长功能，这些功能包括生物固氮、溶解土壤中的磷酸盐、提高植物抗逆性、促进植物对微量元素的吸收、调节植物激素分泌等。研究发现，多种芽孢杆菌属细菌属于植物促生菌，例如：巨大芽孢杆菌具有良好的溶磷效果，蜡样芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌可以有效提高植物的抗病性。

目前，常在农作物生长期的不同阶段施用各种植物促生菌制剂以提高农作物产量。现有的植物促生菌制剂是利用专用培养基发酵某种或某些植物促生菌种制成的，这种制备模式成本高昂。

发明内容

本发明为了弥补现有技术中植物促生菌制剂制备成本高昂的问题，提供了一种促进作物生长的芽孢杆菌制剂的制备方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种促进作物生长的芽孢杆菌制剂的制备方法，包括如下步骤：（1）将浒苔粉加入无菌去离子水中得到浒苔粉悬液，将上述浒苔粉悬液煮沸30min至40min，冷却至室温后调整pH值为7.0至7.5，制得浒苔提取液；（2）将枯草芽孢杆菌粉剂、解淀粉芽孢杆菌粉剂、巨大芽孢杆菌粉剂分别按质量体积比1g：100mL接种于同一LB液体培养基中，并在摇床上连续培养24h，得到菌种扩增液；（3）用LB液体培养基将菌种扩增液的OD₆₀₀值调整为0.6，得到菌种标准液；（4）将菌种标准液按体积比1:500至1:1000接种于浒苔提取液中，并在摇床上连续培养72h至96h，得到发酵液；（5）发酵液经冻干后按质量比15:1至20:1与乳清粉混合，制得促进作物生长的芽孢杆菌制剂。

本发明利用浒苔提取液制备含枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的芽孢杆菌制剂；浒苔因价格低廉，可大幅降低上述三种植物促生菌的扩增培养成本。

优选的，步骤（1）中，浒苔粉按质量体积比1g：50mL至1g:100mL加入无菌去离子水中。

优选的，步骤（2）中，接种枯草芽孢杆菌粉剂、解淀粉芽孢杆菌粉剂、巨大芽孢杆菌粉剂的LB液体培养基在摇床上以28℃至30℃、90rpm至120rpm条件连续培养。

优选的，步骤（4）中，接种菌种标准液的浒苔提取液在摇床上以30℃、100rpm条件连续培养。

优选的，步骤（5）中，发酵液在-10℃至-30℃下真空冻干。

本发明中，浒苔粉由浒苔粉碎制成。浒苔是石莼科、浒苔属藻类植物，藻体鲜绿色，由单层细胞组成，围成管状或粘连为带状。浒苔在我国近海广泛分布，且繁殖能力强、数量大，因而浒苔粉的原料成本较低。已有研究发现，浒苔的有机质含量较丰富。

枯草芽孢杆菌粉剂、解淀粉芽孢杆菌粉剂、巨大芽孢杆菌粉剂分别是枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌的干粉，上述三种细菌均属于芽孢杆菌属。现有研究已经发现，上述三种细菌属于植物促生菌。

本发明相对于现有技术，具有以下有益效果：