[发明专利]长链非编码RNA及特异性干扰长链非编码RNA表达的siRNA的应用在审

专利信息
申请号: 202110954306.0 申请日: 2021-08-19
公开(公告)号: CN113652483A 公开(公告)日: 2021-11-16
发明(设计)人: 殷欣;胡可适;陆申新;张锋;刘文凤 申请(专利权)人: 复旦大学附属中山医院
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/113;A61K31/7088;A61P35/00
代理公司: 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人: 褚明伟
地址: 200032 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 长链非 编码 rna 特异性 干扰 表达 sirna 应用
【权利要求书】:

1.一种长链非编码RNA在制备肝癌预后评估试剂中的应用,其特征在于,所述长链非编码RNA是LINC00601,基因序列如SEQ ID No.1所示。

2.根据权利要求1所述的一种长链非编码RNA在制备肝癌预后评估试剂中的应用,其特征在于,所述长链非编码RNA应用于制备肝癌奥沙利铂治疗疗效评估试剂。

3.一种长链非编码RNA在制备肝癌预后评估试剂盒中的应用,其特征在于,所述的长链非编码RNA是LINC00601,基因序列如SEQ ID No.1所示。

4.根据权利要求3所述的一种长链非编码RNA在制备肝癌预后评估试剂盒中的应用,其特征在于,所述长链非编码RNA应用于制备肝癌奥沙利铂治疗疗效评估试剂盒。

5.根据权利要求3所述的一种长链非编码RNA在制备肝癌预后评估试剂盒中的应用,其特征在于,所述试剂盒中还含有说明书,说明书记载内容:长链非编码RNA对肝癌预后评估的方法为:

(1)采集样本及RNA抽提:采集样本并使用纯化试剂盒提取样本中的总RNA,

(2)反转录成cDNA:配置反转录反应体系,进行反转录反应得到cDNA,

(3)LINC00601的q-PCR定量检测:配置q-PCR反应体系,利用荧光定量PCR仪进行荧光定量检测,

步骤(1)中,所述样本包括组织样本、细胞样本;

步骤(2)中,所述反转录反应体系为:5μL 4×EZscript RT Mix II,1μg总RNA,并用DEPC水将反应体系补足至20μL;反应过程为:42℃15min,85℃10sec;

步骤(3)中,所述q-PCR反应体系为:

2×SYBR Green qPCR Master Mix(ROX2 plus) 10μL

正反PCR引物 10μM各0.4μL

反转录cDNA 4μL

ddH2O 5.2μL

总反应体系 20μL;

反应过程为:

热启动酶活化:95℃×5min;

PCR扩增:95℃×10sec→60℃×30sec:共40cycle;

溶解曲线检测:95℃×15sec→60℃×1min→95℃×30sec→60℃×15sec。

6.一种长链非编码RNA在制备肝癌治疗药物中的应用,其特征在于,所述的长链非编码RNA是LINC00601,基因序列如SEQ ID No.1所示。

7.根据权利要求6所述的一种长链非编码RNA在制备肝癌治疗药物中的应用,其特征在于,所述长链非编码RNA应用于制备耐奥沙利铂肝癌细胞治疗药物。

8.一种特异性干扰长链非编码RNA表达的siRNA,其特征在于,所述siRNA选自基因序列如SEQ ID No.4所示的siRNA1、如SEQ ID No.5所示的siRNA2或如SEQ ID No.6所示的siRNA3。

9.一种特异性干扰长链非编码RNA表达的siRNA在制备肝癌治疗药物中的应用,其特征在于,所述siRNA如权利要求8所述。

10.根据权利要求9所述的一种特异性干扰长链非编码RNA表达的siRNA在制备肝癌治疗药物中的应用,其特征在于,所述siRNA应用于制备耐奥沙利铂肝癌细胞治疗药物。

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