[发明专利]一种家族性高胆固醇血症基因检测文库、其构建方法和试剂盒有效
| 申请号： | 202110951660.8 | 申请日： | 2021-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN113684269B | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 刘哲;梁庆渊;赵娜娜;赖开生;刘昕超;高璇;李方玉;侯青;惠汝太 | 申请（专利权）人： | 江苏百世诺医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京百欧知识产权代理事务所(普通合伙) 11930 | 代理人： | 吴泳历;邹晓艳 |
| 地址： | 225316 江苏省泰州市中国医*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 家族 胆固醇 基因 检测 文库 构建 方法 试剂盒 | ||
1.一种用于DNBSEQ测序平台的家族性高胆固醇血症基因检测文库的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)获得DNA样本；
2)采用引物组1、引物组2、引物组3分别对所述DNA样本进行第1轮多重PCR反应得到扩增产物；
3)第1轮多重PCR反应得到的PCR产物先分别加入接头引物1和接头引物2进行连接反应，反应完毕后的PCR产物以体积比6-8﹕5-7﹕1-3合并，然后PCR合并产物进行第2轮接头序列PCR反应，得到基因检测文库；
所述引物组1的序列为SEQ ID NO.1-152，检测如下基因：LDLRAP1基因、LDLR基因，APOB基因，PCSK9基因；
所述引物组2的序列为SEQ ID NO.153-322，检测如下基因：LDLR基因，APOB基因，PCSK9基因，LDLRAP1基因；
所述引物组3的序列为SEQ ID NO.323-382，检测如下基因或基因位点：LDLRAP1基因，CELSR2基因的多态性位点rs629301，ABCG8基因的多态性位点rs4299376，SLC22A1基因的多态性位点rs1564348，HFE基因的多态性位点rs1800562，MYLIP基因的多态性位点rs3757354，ST3GAL4基因的多态性位点rs11220462，NYNRIN基因的多态性位点rs8017377，APOE基因的多态性位点rs429358、rs7412，LDLR基因的多态性位点rs6511720，APOB基因的多态性位点rs1367117，PCSK9基因的多态性位点rs2479409；
所述接头引物1的序列为SEQ ID NO.383所示，所述接头引物2的序列为SEQ ID NO.384所示；
其中，引物组1和引物组2的第1轮多重PCR反应的反应条件如下：
引物组3的第1轮多重PCR反应的反应条件如下：
第2轮接头序列PCR反应的反应条件如下：
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏百世诺医疗科技有限公司，未经江苏百世诺医疗科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110951660.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
