[发明专利]一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型及其构建方法

权利要求书

1.一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括：

获得低危急性髓系白血病小鼠的PDX模型；

向所述低危急性髓系白血病的PDX模型的小鼠腹腔注射阿糖胞苷诱发出现化疗导致的血小板减少症，获得低危急性髓系白血病CIT的PDX模型。

2.根据权利要求1所述的一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述获得低危急性髓系白血病小鼠的PDX模型，包括：

采集低危急性髓系白血病病患者骨髓样本，分离所述骨髓样本中的CD34⁺的AML细胞；

将4～5周龄的雌性B-NSG小鼠饲养7天后，用X-ray放射线辐照；

将所述辐照后的B-NSG小鼠经尾静脉注射所述CD34⁺的AML细胞，获得低危急性髓系白血病小鼠的PDX模型。

3.根据权利要求2所述的一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述低危急性髓系白血病患者的筛选标准为：

a)年龄≥18岁；

b)外周血和骨髓的细胞涂片及细胞化学检查符合FBA和WHO发布的第26，36，37项急性髓系白血病的诊断标准；并有流式细胞仪检测、染色体检测、基因检测等检测结果提示为AML低危组的患者；

c)ECOG行为状态评分为0～2分；

d)肝肾功能基本正常：血胆红素≤34.2μmol/L，AST/ALT在正常值上限2倍以下，血肌酐≤222μmol/L；心功能正常：EF50％；肺功能：室内氧饱和度≥95％。

4.根据权利要求2所述的一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述尾静脉注射后，还包括对所述低危急性髓系白血病小鼠的PDX模型进行检测，所述检测的方法包括：

在所述接种后每7天采血一次，并通过流式细胞术检测人源AML原始细胞比例；抽取1只上述流式细胞术检测阳性的小鼠进行取材，通过脾脏和肝脏病理切片检测、荧光原位杂交检测和定量PCR检测NPM1表达的方式，鉴定建模是否成功。

5.根据权利要求2所述的一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述尾静脉注射CD34⁺的AML细胞的量为1×10⁷个细胞/只。

6.根据权利要求1所述的一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述阿糖胞苷的注射量为：每次注射60mg/kg，浓度为20mg/ml的Ara-c药物溶液，每天一次，腹腔注射，连续三天。

7.根据权利要求1所述的一种低危急性髓系白血病CIT的PDX模型的构建方法，其特征在于，所述腹腔注射阿糖胞苷后，还包括对所述低危急性髓系白血病CIT的PDX模型进行检测，所述检测的方法包括：

每天观察小鼠状态并记录体重的变化，每2天尾静脉采血一次监测小鼠血常规的变化，若出现三系减少，其中血小板减少至基础值70％以下，说明建模成功。

8.一种采用权利要求1-7任一项所述方法构建得到的低危急性髓系白血病CIT的PDX模型。