[发明专利]一种检测水中微囊藻毒素的方法

权利要求书

1.一种检测水中微囊藻毒素的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)将水样经过0.22μm的MCE滤膜过滤，得到预处理水样；

(2)通过在线固相萃取超高效液相色谱串联质谱法对所述预处理水样进行在线固相萃取与分析测定；

其中，在线固相萃取采用C8固相萃取柱；

在进行分析测定时，超高效液相色谱条件为：采用流动相以梯度的方式进行洗脱：

流动相：A液为0.1％甲酸乙腈溶液，B液为0.1％甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0-4.6min，2％A液，98％B液；4.6-10.0min，2％A液-75％A液，98％B液-25％B液，10.0-11.0min，75％A液-0％A液，25％B液-100％B液；流速0.4mL/min；柱温35℃，进样体积：2mL。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

采用的C8固相萃取柱为粒径为10μm、内径为2.1mm、柱长为30mm的C8 DirectConnect HP固相萃取柱。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

在进行分析测定时，超高效液相色谱采用的色谱柱为粒径为1.6μm，内径2.1mm，柱长为50mm的ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

在进行分析测定时，质谱条件为：使用三重四极杆质谱仪，采用电喷雾离子源，正离子扫描以及多反应监测模式；毛细管电压：3.70kV；离子源温度：150℃；脱溶剂温度：500℃；脱溶剂气流量：1000L/h；锥孔气流量：50L/h；锥孔气压：30V；碰撞气流量：0.06mL/min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述方法能同时检测水中8种微囊藻毒素；

所述8种微囊藻毒素为MC-LR、MC-YR、MC-RR、MC-WR、MC-LA、MC-LF、MC-LY、MC-LW。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

所述方法在检测8种微囊藻毒素时的质谱测定参数为：

MC-LR，母离子995.4，定性离子135，定量离子213，锥孔电压85V，碰撞能量75eV；

MC-YR，母离子1045.6，定性离子135，定量离子213，锥孔电压85V，碰撞能量85eV；

MC-RR，母离子519.7，定性离子135，定量离子440.4，锥孔电压42V，碰撞能量32eV；

MC-WR，母离子1068.5，定性离子135，定量离子213，锥孔电压60V，碰撞能量95eV；

MC-LA，母离子910，定性离子135，定量离子776，锥孔电压40V，碰撞能量80eV；

MC-LF，母离子986.3，定性离子135，定量离子213，锥孔电压42V，碰撞能量68eV；

MC-LY，母离子1002.6，定性离子135，定量离子985，锥孔电压45V，碰撞能量80eV；

MC-LW，母离子1025.5，定性离子135，定量离子213，锥孔电压45V，碰撞能量65eV。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

在进行步骤(2)之前，还包括往步骤(1)得到的预处理水样中加入浓度为1μg/L的亮氨酸脑啡肽甲醇溶液作为内标液的步骤。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

在进行步骤(2)之前，还包括通过在线固相萃取超高效液相色谱串联质谱法对包含有8种微囊藻毒素的混合标准液进行在线固相萃取与分析测定以绘制出标准曲线的步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：

采用8种微囊藻毒素单标液配制成浓度分别为10ng/L，20ng/L，50ng/L，100ng/L，200ng/L，500ng/L和1000ng/L的7个不同浓度的包含有8种微囊藻毒素的混合标准液，用于标准曲线的绘制。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于：

所述方法在检测水中微囊藻毒素时在10ng/L-1000ng/L的范围内具有线性关系，相关系数均＞0.99；

所述方法检测水中微囊藻毒素的检出限为0.02-0.37ng/L，定量限为0.07-1.24ng/L。