[发明专利]一种鉴别罗氏鼢鼠的试剂盒及方法

说明书

本发明提供了一种鉴别罗氏鼢鼠的试剂盒及方法，属于鉴定技术领域。该试剂盒包括检测待检物种的16S rRNA基因中如下SNP位点的试剂：SEQID NO:3所示保守motif序列的第34位。本发明提供了一种简便、准确鉴定罗氏鼢鼠物种的试剂盒以及鉴定罗氏鼢鼠的方法，解决了通过形态进行鼢鼠物种鉴定的难题，在鼢鼠的物种鉴别中具有优异的应用前景。

技术领域

本发明属于鉴定技术领域，具体涉及一种鉴别罗氏鼢鼠的试剂盒及方法。

背景技术

鼢鼠是鼢鼠亚科(Myospalacinae)动物的统称，主要分布于中国和西伯利亚南部地区。现存鼢鼠包括凸颅鼢鼠属(Eospalax)和平颅鼢鼠属(Myspalax)，我国几乎分布了所有现生鼢鼠物种。平颅鼢鼠包括草原鼢鼠(M.aspalax)和东北鼢鼠(M.psilurus)等2-3个物种，凸颅鼢鼠属只分布在我国，包括中华鼢鼠(E.fontanieri)、斯氏鼢鼠(E.smithi)、罗氏鼢鼠(E.rothschildi)、高原鼢鼠(E.baileyi)、甘肃鼢鼠(E.cansus)和秦岭鼢鼠(E.rufescens)等6个物种。

罗氏鼢鼠主要分布在我国的湖北、四川东部以及陕西南部。罗氏鼢鼠主要栖息在海拔1500米以上的华山松幼林地、苗圃地、农耕地及草地下，拱洞筑巢，营地下生活。罗氏鼢鼠成鼠体长150-215毫米，体重114-365克。体粗壮呈圆筒形，毛细而密，夏毛基部灰黑色，毛尖黄色，成体呈棕黄色或锈红色，由体侧至腹部毛色渐淡。有的整个体背及两侧均为明显的锈红色，腹部均为灰黑色，在毛尖部分稍带锈红色。头宽而扁，鼻尖平钝，下唇毛色乳白，多数额部中央有明显的白色毛斑，眼极小，耳壳不发达，常被覆于绒毛之下。四肢短而粗壮，并具尖锐的爪，前足爪较后足爪发达，向外弯曲呈镰刀状。尾短小，被短毛，端部白色。

鼢鼠几乎终生都生活在密闭的地下洞道系统中，独特的地下生活方式使得其在觅食、婚配、繁殖等多方面具有特殊性，引起了科学家的广泛兴趣。识别鉴定生物种类是认识和保护生物多样性的基础，每种生物只有能够被准确识别后，才能开展更多领域的研究。但是由于不同鼢鼠生活环境相似而形态趋同，未经专业训练通过形态进行物种准确鉴定非常困难。

因此，研究一种能够快速、准确进行罗氏鼢鼠物种鉴定的方法与试剂，具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够简便、准确鉴定罗氏鼢鼠物种的试剂盒和方法，解决通过形态进行鼢鼠物种鉴定的难题。

本发明提供了一种鉴别罗氏鼢鼠的试剂盒，所述试剂盒包括检测待检物种的16SrRNA基因中的如下SNP位点的试剂：SEQ ID NO:3所示保守motif序列的第34位。

进一步地，所述SNP位点的碱基如下：SEQ ID NO:3所示保守motif序列的第34位碱基为A。

进一步地，所述试剂为测序用试剂、KASP方法用试剂或限制性片段长度多态性方法用试剂。

进一步地，所述试剂盒还包括扩增16S rRNA基因保守motif序列的试剂；所述保守motif序列为SEQ ID NO:3所示的序列。

进一步地，所述扩增16S rRNA基因保守motif序列的试剂包括SEQ ID NO:1～2所示的引物对。

本发明还提供了扩增16S rRNA基因保守motif序列的试剂在制备鉴别罗氏鼢鼠的试剂盒中的用途，所述保守motif序列是SEQ ID NO:3所示的序列。

进一步地，所述扩增16S rRNA基因保守motif序列的试剂包括SEQ ID NO:1～2所示的引物对。

本发明还提供了一种鉴别罗氏鼢鼠的方法，包括如下步骤：

(1)提取待检鼢鼠样本的基因组总DNA；