[发明专利]美国白蛾Iap基因dsRNA及其细菌表达菌液和应用有效
| 申请号： | 202110941944.9 | 申请日： | 2021-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN113430201B | 公开（公告）日： | 2022-04-01 |
| 发明（设计）人： | 张真;张珣;张苏芳;孔祥波;刘福;樊智智;方加兴 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/70;A01N57/16;A01P7/04 |
| 代理公司： | 北京知汇林知识产权代理事务所(普通合伙) 11794 | 代理人： | 董涛 |
| 地址： | 100091*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 美国 iap 基因 dsrna 及其 细菌 表达 应用 | ||
1.一种美国白蛾Iap基因dsRNA，其特征在于，所述dsRNA片段的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
2.一种表达权利要求1所述的dsRNA的细菌表达液，其特征在于，所述细菌表达液的制备方法包括：
(1)以美国白蛾cDNA为模板，用dsHcIap引物进行PCR扩增，获得所述dsRNA片段，所述dsHcIap引物序列如SEQ ID NO.7和8所示；
(2)将所述dsRNA片段连接到线性质粒上，构建重组载体；
(3)将含有dsRNA片段的重组表达载体导入到细菌感受态细胞中培养；
(4)通过IPTG诱导dsRNA产生，培养收集菌液。
3.根据权利要求2所述的细菌表达液，其特征在于，所述质粒为线性化的L4440，和/或所述细菌为大肠杆菌HT115。
4.权利要求1所述的dsRNA或权利要求2所述的细菌表达液在防治美国白蛾中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，通过饲喂或喷洒表达Iap基因dsRNA的细菌表达液实现对美国白蛾的防治。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，通过饲喂混合了表达Iap基因dsRNA的细菌表达液的人工饲料实现对美国白蛾的防治。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，将制备好的人工喂养饲料，每30g切成0.5x0.5x0.5 cm大小块状，喷洒表达Iap基因dsRNA的浓度为107CFU/mL的HT115菌液5mL，常温风干1h后，进行饲喂。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，直接向植株上喷洒表达Iap基因dsRNA的细菌表达液实现对美国白蛾的防治。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述细菌表达液为大肠杆菌HT115菌液。
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