[发明专利]一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物及其应用

说明书

本发明公开了一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物及其应用，属于分子生物学技术领域。所述分子标记引物的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，以不结球白菜DNA为模板，通过聚合酶链式反应扩增该片段，根据目的条带的有无，可筛选出不结球白菜早抽薹品种或材料。本发明提供的分子标记引物，可以快速检测不结球白菜早抽薹的品种和材料，极大的节约时间和资源，大大提高选择效率，从而加快育种进程。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物及其应用。

背景技术

不结球白菜（ Brassica campestris ssp . chinensis Makino）属十字花科芸薹属芸薹种白菜亚种，又名青菜、小白菜、油菜等，是我国长江中下游及其以南地区的一种四季栽培的蔬菜。不结球白菜质地鲜嫩，营养丰富，深受人们喜爱，在我国蔬菜消费中占有重要地位。花的产生代表着植物由营养生长转变为生殖生长，不结球白菜以营养器官为产品，先期抽薹不仅降低生物产量，还影响其商品性和食用价值，给生产带来巨大的损失。

因此，设计一种专用于不结球白菜早抽薹品种和材料的筛选、鉴定方法极为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物，该组引物可用于不结球白菜早抽薹的筛选和鉴定，快速准确。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物，命名为pF7，其序列为：

pF7F：5’-CGATGGTACGGTGATGTCGT-3’（SEQ ID NO.1），

pF7R：5’-GGTGTTCCGGACCTTAGACA-3’（SEQ ID NO.2）。

上述分子标记引物在鉴定不结球白菜早抽薹品种或材料中的应用。

一种鉴定不结球白菜早抽薹品种或材料的方法，包括以下步骤：

步骤1，提取待鉴定品种或材料的基因组DNA；

步骤2，以步骤1提取的DNA为模板，利用上述分子标记引物pF7对其进行PCR扩增；

步骤3，以步骤2的PCR扩增产物进行电泳分离，获得各样品的带型，如果得到517bp的片段，则说明待鉴定品种或材料为早抽薹。

进一步地，步骤2中，PCR扩增具体为：在20μL反应体系中，50ng/μL DNA模板1μL、10μM pF7引物各1μL、2× Primer Star 10μL、去离子水7μL；PCR扩增程序为：95℃预变性2min，98℃变性30s，56.5℃退火30s，72℃延伸30s，72℃后延伸10min，35个循环，4℃保存。

有益效果：

1. 本发明通过使用标记引物pF7，可快速、高效的鉴定不结球白菜早抽薹品种和材料。

2. 本发明辅助选择方便，节约成本。不结球白菜抽薹开花时间品种的常规选育方法周期长，成本高，消耗大量的人力物力，通过本发明，可以实现苗期选择，减少工作量，提高了选择效率。

附图说明

图1为标记引物pF7在不同品种的不结球白菜PCR扩增后的琼脂糖凝胶电泳结果图，其中：M为DL2000 Marker，泳道1-6、8-23\24-29、31-33、39为早抽薹品种或材料，泳道7\30、34-38为晚抽薹品种或材料。

具体实施方式