[发明专利]一种刺激真核藻类多糖的方法

说明书

本发明提供了一种刺激真核藻类多糖的方法。本发明提供的方法通过特定的培养基对真核藻类进行培养，使其体内多糖得到加强和提高，其次由改性四氧化三铁填料刺激并负载真核藻类，使其胞外多糖的生产得到提高，从而可以提高真核藻类的内源多糖(体内多糖)和外源多糖(胞外多糖)的累积，使真核藻类的多糖产量更高，以充分发挥多糖的各方面作用，提高真核藻类的资源化应用。

技术领域

本发明属于农业领域，更具体地，本发明涉及一种刺激真核藻类内源多糖的方法，以及一种刺激真核藻类外源多糖的方法。

背景技术

以小球藻为代表的微藻属于绿藻门绿球藻目卵囊藻科，是普生性的单细胞绿藻，富含多糖、蛋白质、不饱和脂肪酸、类胡萝卜素等多种营养物质，对污染物质能起到净化、转化的作用的同时，于医学、食品等领域均存在着不容忽视的能力。近年来有研究学者发现，胞外多糖，具有高硫酸盐水平，有消炎、抗肿瘤、抗菌、免疫调节等功能。在呼吸系统疾病中能起到扩张支气管、镇咳和抗凝血的作用，能预防慢性气管炎症；一些小球藻的胞外多糖还对结肠癌细胞有抑制作用；对细菌起抑制生物膜形成的作用，阻止病原体的黏附。多糖的药用价值带来了多糖保健品和多糖药物等产品的面世，但由于多糖的结构等研究是棘手难题，一直没有广泛应用至市场。

小球藻胞外多糖和多糖的组成糖相似，主要为鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖，但功能却有差异。多糖的抗氧化性、营养与其他功能特性，具有高的应用潜力。小球藻是容易获得的物种，且有繁殖能力强的特点，因此如何提高胞外多糖产量，是提高小球藻资源化应用的是一个关键点。

发明内容

本发明提供了一种刺激真核藻类内源多糖的方法，以及一种刺激真核藻类外源多糖的方法，促进了真核藻类内源多糖和外源多糖的累积。

首先，本发明提供了一种刺激真核藻类内源多糖的方法，其包括如下步骤：

(11)将所述真核藻类接种至培养基A中进行光培养；

(12)当COD和TN降解率分别达到70％和80％以上时，将所述真核藻类转接至培养基B中进行暗培养；

其中，每升所述培养基A的组分为：硝酸钠0.24～0.48g，磷酸氢二钾0.05g，七水硫酸镁0.1g，水合氯化钙0.05g，乙酸钠1～2g，余量为水；

每升所述培养基B的组分为：硝酸钠0.24～0.48g，磷酸氢二钾0.05g，七水硫酸镁0.1g，水合氯化钙0.05g，乙酸钠0.5～0.8g，余量为水；

所述暗培养加入了添加剂，以所述培养基B为基准，所述添加剂由甘油5～10g，环糊精2～4g，甘氨酸1～2g，聚乙烯醇0.5～0.8g组成。

优选地，步骤(11)中，所述真核藻类接种至所述培养基A中时，所述真核藻类与所述培养基A的质量比为(3～10):100。

优选地，所述光培养和所述暗培养的条件均是25～35℃，130～160rpm，培养时间为24h。

优选地，步骤(12)中，所述暗培养加入了所述添加剂时，是在超声频率45～65KHz、超声波功率为150W下处理10～20min。

优选地，步骤(12)中，所述暗培养中，所述真核藻类细胞浓度为10⁷～10⁸个/ml。

其次，本发明还提供了一种刺激真核藻类外源多糖的方法，其包括如下步骤：

(21)提供本发明上述刺激真核藻类内源多糖的方法得到的真核藻类；

(22)将所述真核藻类接种于改性四氧化三铁填料中进行培养，当所述改性四氧化三铁填料附上的叶绿素a达到0.5～1mg/g填料时，培养完毕，得到培养后的填料；

(23)将所述培养后的填料接种于培养基C中，并引入食品废水进行培养；