[发明专利]一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法

权利要求书

1.一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：组织破碎预处理，对脐带进行预处理；

S2：多步酶解，对脐带进行酶解，制得酸解液；

S3：离心过滤，对酶解液进行过滤；

S4：超滤分离提纯，对过滤好的酸解液进行提纯；

S5：将酸解液分成两份，一份用于制作胶原活性肽，一份用于制作多肽；

S6：对制作胶原活性肽的酶解液依次进行透析纯化、盐析纯化、再次透析纯化和干燥；

S7：脱色，对制作多肽的酸解液进行脱色；

S8：装瓶包装。

2.根据权利要求1所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，S1步骤中将烘干后的脐带使用液氮研磨法粉碎为50-200目的脐带组织粉末，S2步骤中需要先将盐酸、磷酸和苹果酸按配比2-8:3-9:4-10的配比进行混合制成酸液，然后再将蒸馏水和酸液添加到脐带组织粉末内，按100g脐带组织粉末距离，需1-2L的蒸馏水，0.5-1.5mol/L的酸液，得到酸解液。

3.根据权利要求1所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，S3步骤中酶解液在30-45℃、2500-4000rpm条件下离心10-15min，最后对离心出来的酸解液进行收集。

4.根据权利要求1所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，S4步骤中将酸解液倒入超滤仪内进行提纯，其设备的压力在0.3-0.5MPa，分子量为15000-20000。

5.根据权利要求1所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，S7步骤中将酸解液内经过浓缩、加活性碳脱色，搅拌并加热至80-85℃，保持半小时后过滤，向滤液中加入质量分数为20％-35％的聚乙烯吡洛烷酮作为冻干添加剂，冷冻干燥15-25h，得到多肽粉。

6.根据权利要求1所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，S6步骤中，透析所用的透析介质为0.01-0.03mol/L且pH值7.0-7.4的Na₂HPO₄水溶液，相对于1体积的酶解产物，透析介质的用量为10-30倍体积，透析的时间为每6-18小时更换透析介质一次，共更换2-8次；透析所得的透析液离心取沉淀后复溶于5-20倍体积的0.5-1.5mol/L的醋酸溶液中，得到透析纯化产物。

7.根据权利要求6所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，将透析纯化产物与NaCl固体混合使得NaCl的终浓度为0.5-1.5mol/L，然后进一步加入含有2-3mol/L的NaCl和0.03-0.08mol/L的Tris-HCl且pH值为7.2-7.7的水溶液以进行盐析，将盐析所得沉淀复溶于5-20倍体积的0.5-1.5mol/L的醋酸溶液中，得到盐析纯化产物。

8.根据权利要求7所述的一种高提取率和制备脐带胶原活性肽及多肽的方法，其特征在于，将盐析纯化产物进行再次透析纯化所用的再次透析介质为去离子水，且相对于1体积的盐析纯化产物，再次透析所用去离子水的用量为10-30倍体积，再次透析的时间为每6-18小时更换去离子水一次，共更换2-8次；并且，将再次透析所得的透析液于-18℃至-22℃的温度下预冷冻8-20小时，再进行真空冷冻干燥。