[发明专利]垫状卷柏总黄酮提取制备及HPLC指纹图谱检测方法

说明书

本技术方案首次公开了一种垫状卷柏药材采用70％甲酸溶剂热回流提取制备总黄酮的方法以及HPLC指纹图谱检测方法，本发明方法制备的总黄酮含量高，建立的指纹图谱具有丰富的指纹特征信息，方法简便、重现性好、准确可靠，可有效鉴别垫状卷柏药材及其混淆品，为垫状卷柏的鉴别和全面质量控制提供依据。

技术领域

本发明涉及一种中药材总黄酮提取制备及HPLC指纹图谱检测方法，更具体的说是垫状卷柏总黄酮提取制备以及垫状卷柏药材指纹图谱的质量控制方法，属于中药技术领域。

背景技术

垫状卷柏为卷柏科植物垫状卷柏Selaginella pulvinata（Hook，etGrev.）Maxim.的干燥全草。全年均可采收，除去须根和泥沙，晒干。卷柏为卷柏科植物卷柏的干燥全草。全年均可采收，除去须根和泥沙，晒干。现行国家标准如下：

【性状】垫状卷柏 须根多散生。中叶（腹叶）两行，卵状披针形，直向上排列。叶片左右两侧不等，内缘较平直，外缘常因内折而加厚，呈全缘状。

【鉴别】（1）本品粉末绿色至黄褐色。叶缘细胞狭长，向外突出呈齿状或长毛状。叶表皮细胞类方形或类长方形，垂周壁近平直，气孔不定式，多同向排列。孢子棕黄色或红棕色，类圆形或类三角形，直径17～77μm，表面具不规则瘤状突起。管胞为梯纹。

（2）取本品粉末2g，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另取卷柏对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-浓氨试液-水（13:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝甲醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检查】 水分不得过10.0%。

【含量测定】 照高效液相色谱法（《中国药典》2020年版通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为330nm。理论板数按穗花杉双黄酮峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备 取穗花杉双黄酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含穗花杉双黄酮（C₃₀H₁₈O₁₀）不得少于0.30%。

【炮制】 垫状卷柏除去残留须根及杂质，洗净，切段，干燥。

【性状】 本品呈卷缩的段状，枝扁而有分枝，绿色或棕黄色，向内卷曲，枝上密生鳞片状小叶。叶先端具长芒。中叶（腹叶）两行，卵状矩圆形或卵状披针形，斜向或直向上排列，叶缘膜质，有不整齐的细锯齿或全缘；背叶（侧叶）背面的膜质边缘常呈棕黑色。气微，味淡。

【鉴别】【检查】【含量测定】同药材

【性味与归经】辛，平。归肝、心经。

【功能与主治】活血通经。用于经闭痛经，癥瘕痞块，跌扑损伤。垫状卷柏炭化瘀止血。用于吐血，崩漏，便血，脱肛。

【用法与用量】5～10g。

【注意】孕妇慎用。

【贮藏】置干燥处。