[发明专利]一种miRNA和人间充质干细胞在制备用于治疗关节炎的药物中的用途

说明书

本发明提供了一种miRNA在制备用于治疗关节炎的药物中的用途，所述miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。还提供了一种表达上述miRNA的人间充质干细胞。还提供了上述的人间充质干细胞在制备用于治疗关节炎的药物中的用途。本发明已鉴定能够广泛靶向修复骨关节炎相关软骨基质及组织的miR‑17‑5p，并且在小鼠DMM模型中鉴定了miR‑17‑5p的骨关节炎治疗能力，并在临床样本中鉴定了骨关节炎严重程度与miR‑17‑5p表达水平高低的联系，同时还制备了能够自主、持续表达miR‑17‑5p的人间充质干细胞，建立以细胞为载体的miR‑17‑5p递送治疗系统，可作为慢性骨关节炎的治疗方法。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种生物小分子和一种细胞，具体来说是一种有效延缓骨关节炎恶化的microRNA(miRNA)和自主、持续表达该miRNA的人间充质干细胞。

背景技术

骨关节炎又称退行性骨关节病，是一种以关节软骨损害为主，同时累及整个关节组织的慢性疾病，临床表现为关节疼痛与相关功能障碍而导致的慢性残疾。由于受损的关节软骨没有自我修复能力，目前医学上没有任何明显有效的方法可以阻止骨关节炎的进一步恶化，绝大多数疾病晚期患者只能选择人工关节置换，以提高生活质量。

关节软骨的结构完整性是软骨健康的重要标志之一，主要由软骨细胞的细胞外基质决定。由于外界生物力学与生物化学的刺激，局部产生多种基质降解酶，使软骨基质逐渐降解，破坏了软骨结构完整性，进而内部的钙化层不断磨损，最终导致骨关节炎的产生与进行性恶化。

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)来源广泛，可以自我更新与多向分化，有较强的炎症调节能力与归巢能力，靶向迁移到组织损伤部位，分泌因子、外泌体等调节微环境；或分化为特定类型的组织细胞进行细胞替代，促进损伤部位修复，在多种临床疾病的治疗中展现出了广阔的应用前景。然而，MSCs因其供体来源、组织来源、分离方法及培养体系的不同，表现出较大的异质性，因此适当的体外预处理诱导培养，可以调节并提高MSCs的特异性疾病治疗能力。其中，脂肪、皮肤与脐血来源的MSCs由于易获取、成瘤率低、性价比高、对患者伤害小且不涉及伦理问题等，成为MSCs培养的理想供体与组织来源。

miRNA是一类内源性、长度约为20-24个核苷酸的小RNA，在体内有多种重要的调节作用。目前发现的miRNA通过多种机制包括调节靶mRNA稳定性、内源性抑制性RNA途径等，可以延缓骨关节炎的部分病理进程，然而在有效修复软骨细胞及其基质方面却皆不尽如人意。研究发现，miR-17～92簇基因功能异常导致的骨骼功能障碍伴随骨单位的缩短和骨关节的融合，提示miR-17～92簇基因可能是潜在的关节疾病靶标。同时，已发现的miRNA都只能对特定的单类基质降解酶产生单向靶向作用，是否存在广泛靶向骨关节炎相关基质降解酶的miRNA，其发现和鉴定有助于研发有效修复骨关节炎病变的分子治疗措施。

目前临床上对骨关节炎的治疗采取梯度治疗措施，采取阶段性物理、药物及关节腔修复手术联合治疗，这些措施仅能轻度延缓骨关节炎的发展；当疾病恶化到晚期，需要进行关节重建手术治疗，包括昂贵且复杂的关节置换术，旨在缓解关节疼痛、恢复关节活动功能。随着关节置换术的发展，术后无进展期10年以上病例占90％以上，然而术后早期假体周围感染和术后远期的假体松动，均需要再次手术修补，极度降低患者生活质量。因此急需一种给药途径简单、创伤小、操作难度低的可逆性治疗药物分子或联合细胞的治疗措施，抑制骨关节炎的进展。

发明内容

针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种有效延缓骨关节炎恶化的microRNA(miRNA)和人间充质干细胞，所述的这种有效延缓骨关节炎恶化的miRNA和人间充质干细胞要解决现有技术对于骨关节炎的治疗效果不佳的技术问题。

本发明提供了一种miRNA(miR-17-5p)在制备用于治疗关节炎的药物中的用途，所述miRNA的核苷酸序列为:caaagugcuuacagugcagguag(如SEQ ID NO.1所示)。