[发明专利]一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒有效
| 申请号： | 202110918125.2 | 申请日： | 2021-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN113604610B | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 苏正元;王华林;邓菲;杨娟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 武汉谦源知识产权代理事务所(普通合伙) 42251 | 代理人： | 尹伟 |
| 地址： | 430071 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 同步 检测 非洲 猪瘟 病毒 狂犬病毒 试剂盒 | ||
1.一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为多重荧光定量PCR试剂盒，包括用于分别扩增非洲猪瘟病毒CD2v基因、非洲猪瘟病毒P72基因和猪伪狂犬病毒EP0基因的引物对以及对应的荧光探针，所述用于扩增CD2v基因的引物对为ASFV-CD2v-F和ASFV-CD2v-R，其对应的荧光探针为ASFV-CD2v-P，所述用于扩增P72基因的引物对为ASFV-P72-F和ASFV-P72-R，其对应的荧光探针为ASFV-P72-P，所述用于扩增EP0的引物对为PRV-EP0-F和PRV-EP0-R，其对应的荧光探针为PRV-EP0-P，所述ASFV-CD2v-F、ASFV-CD2v-R、ASFV-CD2v-P、ASFV-P72-F、ASFV-P72-R、ASFV-P72-P、PRV-EP0-F、PRV-EP0-R和PRV-EP0-P的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示。
2.根据权利要求1所述的一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒，其特征在于，所述荧光探针ASFV-CD2v-P、ASFV-P72-P和PRV-EP0-P的5’端均标记有荧光报告基团，3’端均标记有荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒，其特征在于，所述荧光探针ASFV-CD2v-P的5’端标记的荧光报告基团为FAM，3’端标记的荧光猝灭基团为BHQ1，所述荧光探针ASFV-P72-P的5’端标记的荧光报告基团为ROX，3’端标记的荧光猝灭基团为BHQ2，所述荧光探针PRV-EP0-P的5’端标记的荧光探针为Cy5，3’端标记的荧光猝灭基团为BHQ3。
4.根据权利要求2述的一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照，所述阳性对照包括含有非洲猪瘟病毒P72基因的重组质粒、含有非洲猪瘟病毒CD2v基因的重组质粒和含有猪伪狂犬病毒EP0基因的重组质粒。
5.根据权利要求4所述的一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒，其特征在于，还包括多重荧光定量PCR检测试剂和/或样本提取试剂。
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