[发明专利]一种用于鉴定“仙芝系列”灵芝菌种的分子标记GLMI001引物对和应用在审
申请号: | 202110913110.7 | 申请日: | 2021-08-10 |
公开(公告)号: | CN113502348A | 公开(公告)日: | 2021-10-15 |
发明(设计)人: | 李振皓;李明焱;熊晖;周莎莎;潘德宇;王晓彤;黄庆 | 申请(专利权)人: | 浙江寿仙谷医药股份有限公司;金华寿仙谷药业有限公司;浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 321200 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 鉴定 系列 灵芝 菌种 分子 标记 glmi001 引物 应用 | ||
1.一种用于鉴定“仙芝系列”灵芝菌种的分子标记GLMI001引物对,其特征在于,所述引物对包括上游引物和下游引物;所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述引物对,其特征在于,所述“仙芝系列”灵芝菌种包括仙芝1号、仙芝2号和仙芝3号。
3.一种鉴定“仙芝系列”灵芝菌种的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括权利要求1或2所述引物对。
4.权利要求1或2所述引物对或权利要求3所述试剂盒在鉴定“仙芝系列”灵芝菌种中的应用。
5.一种快速鉴定“仙芝系列”灵芝菌种的方法,其特征在于,包括以下步骤:以待测样品的DNA为模板DNA,与权利要求1或2所述引物对或权利要求3所述试剂盒中的引物对混合后进行PCR扩增,PCR产物在600bp~700bp有3条DNA条带,则表明待测样品为仙芝1号;在600bp~700bp有1条DNA条带,则表明待测样品为仙芝2号;在600bp~700bp有2条DNA条带,则表明待测样品为仙芝3号。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应程序包括:94℃预变性5min;94℃变性40s,56℃退火40s,72℃延伸90s,40个循环;72℃延伸10min。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系以20μL计,包括DNA模板2μL、上游引物1μL、下游引物1μL、2*Taq MasterMix 10μL和ddH2O 6μL。
8.根权利要求7所述的方法,其特征在于,所述上游引物和下游引物的浓度均为10μmol/L;所述DNA模板的浓度为50ng/μL。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述待测样品包括菌丝。
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