[发明专利]一组同时检测B/C/E组腺病毒的单克隆抗体和试纸条

说明书

本发明提供一组同时检测B/C/E组腺病毒的单克隆抗体和试纸条，涉及腺病毒检测技术领域。本发明通过筛选获得了针对目前流行的呼吸道腺病毒HAdV‑B/C/E组特异的单克隆抗体，并利用其制备了一种检测B/C/E组腺病毒的胶体金检测试纸条，该试纸条具有很好的检测效果，其中对ADV1/2/5/6的最低检测限可达1.0×10³VP/ml；对ADV3/4/7的检测限可达1.0×10⁴VP/ml；并验证具有良好的特异性。本发明提供了一对单克隆抗体细胞株及一种同时检测B/C/E组腺病毒的快速检测方法，该检测方法对呼吸道腺病毒的检测效果好，操作简便，可以作为腺病毒感染的临床辅助诊断。

技术领域

本发明属于腺病毒检测技术领域，具体涉及一组同时检测B/C/E组腺病毒的单克隆抗体和试纸条。

背景技术

腺病毒（Adenovirus）是一种无包膜的二十面体双股DNA病毒，常侵犯呼吸系统、消化系统、泌尿系统、眼结膜等多器官。腺病毒在人群中常年流行，可发生于任何年龄组，全球多个国家和地区都曾发生过腺病毒感染的暴发，目前尚无特效的治疗方法。腺病毒作为一种机会性病原，大约50%的感染无症状，但仍具有传染性。

目前已发现的可感染人类的腺病毒约有69种血清型，可分为A-G的7个亚群。不同血清型腺病毒造成感染的组织嗜性有差异，其中B组、C组和E组常引起呼吸道感染，E组还可感染眼结膜，A组和F组主要感染胃肠道。腺病毒感染以呼吸道症状最为常见，其中B组的3/7型、C组的1/2/5/6型多引起儿童的急性呼吸道感染，E组的4型多与军事训练营地的急性呼吸道疾病疫情有关。腺病毒的抵抗力、感染性强，常引起聚集人群如家庭、幼儿园、小学等的暴发性流行，因此快速准确的诊断和处置，对控制和预防腺病毒感染及传播十分必要。

病毒培养目前作为实验室诊断的金标准，但受细胞培养周期的限制，难以在临床中应用。荧光定量PCR与细胞培养法相比，灵敏度较高，但耗费昂贵，需专业人员操作，且大量样本操作时易出现污染导致假阳性，因此现场应用受限。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一组产1H3和2A7单克隆抗体的杂交瘤细胞组、单克隆抗体及制备方法和应用，操作简便、耗时短，能快速地检测出呼吸道样本中的腺病毒感染，检测准确率高，非常适合呼吸道腺病毒感染的快速辅助诊断。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一组同时检测B/C/E组腺病毒的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括1H3和2A7，所述1H3的重链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.3所示；所述1H3的轻链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4~SEQ ID NO.6所示；

所述2A7的重链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.11~SEQ ID NO.13所示；所述2A7的轻链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.14~SEQ ID NO.16所示。

优选的，所述1H3的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述1H3的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

优选的，编码所述1H3的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，编码所述1H3的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。

优选的，所述2A7的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述2A7的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。

优选的，编码所述2A7的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，编码所述2A7的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示。