[发明专利]一种NIR响应型仿生膜纳米囊泡及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种NIR响应型仿生膜纳米囊泡的构建方法，其特征在于，该构建方法包括以下步骤：

S1、收集肿瘤细胞，依次采用冻融法、梯度离心和重悬，获得肿瘤细胞膜溶液；

S2、采用溶剂扩散法，获得热敏脂质给药系统；具体方法为：

S21、将PD-1/PD-L1抑制剂、IR-780碘化物修饰脂质嫁接物、热敏脂质DPPC以及胆固醇溶解于乙醇中，且在50～70℃的水浴中加热，得到乙醇相溶液；

其中，所述乙醇相溶液中PD-1/PD-L1抑制剂的质量百分比为5～20％、IR-780碘化物修饰脂质嫁接物的质量百分比为10～20％、热敏脂质DPPC的质量百分比为65～75％、胆固醇的质量百分比为3～6％；

S22、按照F68水溶液与乙醇相溶液的体积比为(8～12)∶1的比例量取F68水溶液，并在55～65℃条件下，将所述乙醇相溶液快速分散至F68水溶液中，且在300～600rpm的转速下搅拌5～10min，再冷却至室温，制备得到热敏脂质给药系统；

此外，所述IR-780碘化物修饰脂质嫁接物是通过以下方法获得：

S211、称取5～15mg的IR-780碘化物和20～50mg的NH₂-PEG-DSPE，溶于二氯甲烷溶液中，得到含有IR-780碘化物的二氯甲烷溶液；

S212、以三乙胺为缚酸剂，按三乙胺与IR-780碘化物的摩尔比为(1～3)∶1的比例称取三乙胺，并加至所述含有IR-780碘化物的二氯甲烷溶液中，室温搅拌反应8～30h；

S213、反应结束后，将反应溶液加入至8～12倍体积的无水乙醚中，3～5℃条件下过夜，而后在转速为2500～3500rpm的条件下离心4～6min，去除副产物，再将沉淀物干燥，得到IR-780碘化物修饰脂质嫁接物；

S3、将所述肿瘤细胞膜溶液与热敏脂质给药系统混合，并用脂质体挤出器挤出和过滤，得到NIR响应型仿生膜纳米囊泡；所述肿瘤细胞膜溶液与热敏脂质给药系统的质量比为1∶(1～5)；所述肿瘤细胞膜溶液的浓度为0.5～2mg/mL。

2.根据权利要求1所述的一种NIR响应型仿生膜纳米囊泡的构建方法，其特征在于，所述S3中，所述过滤时，是依次采用450～350nm、250～150nm、150～50nm的聚碳酸酯滤膜进行过滤。

3.根据权利要求2所述的一种NIR响应型仿生膜纳米囊泡的构建方法，其特征在于，所述S21中，所述PD-1/PD-L1抑制剂为BMS-1、BMS-1001、BMS202、BMS-1166中的至少一种。

4.根据权利要求2所述的一种NIR响应型仿生膜纳米囊泡的构建方法，其特征在于，所述S22中，所述F68水溶液的浓度为0.5～1.5mg/mL。

5.一种如权利要求1-4任意一项所述的构建方法制得的NIR响应型仿生膜纳米囊泡。

6.一种如权利要求5所述的NIR响应型仿生膜纳米囊泡在制备肿瘤组织光热响应释放免疫检查点阻断剂中的应用。

7.一种如权利要求5所述的NIR响应型仿生膜纳米囊泡在制备抑制肿瘤生长与转移的光热免疫联合制剂中的应用。