[发明专利]一种大黄素高纯度分离工艺

说明书

本发明公开了一种大黄素高纯度分离工艺，涉及大黄素分离工艺领域，旨在解决现有技术中，使用的试剂还为有毒性的溶剂，对人身和环境均构成威胁的问题，采用的技术方案是，通过向蒸馏水和虎杖粉的混合物内加酶，能够将虎杖粉外部细胞壁分解，从而使虎杖粉中的大黄素更容易被提取出，提高了大黄素的产率；使用乙酸乙酯进行萃取，能够将大黄素从混合物中分离出，且乙酸乙酯无毒无刺激性气味，保护了人员健康和环境安全；使用蒸馏水洗脱能够去除水溶性杂质，提高产品纯度；将过滤得到大黄素粗提取物上层析柱层析后洗脱、减压蒸馏、重结晶，洗脱液采用酒精不仅洗脱效果好，提高了大黄素产率，且无污染、易分离，进一步保护了人员健康和环境安全。

技术领域

本发明涉及大黄素分离工艺领域，具体为一种大黄素高纯度分离工艺。

背景技术

大黄素是一种有机物，化学式为C₁₅H₁₀O₅，橙黄色长针状结晶，在丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色，熔点256～257℃，具有蒽醌的特殊反应，几乎不溶于水，溶于乙醇及碱溶液。

大黄素为蓼科植物虎杖的干燥根茎和根。掌叶大黄的根茎，属植物型药剂。

大黄素的生理活性决定它不仅可用于医疗，亦可以用于保健和日用化工品中，如有人把它用于护发和护肤品中，亦有人把它编入天然色素中去。国外，人们把它作为轻泻剂。

在临床上，用大黄素纯品治疗肿癌，主要用于白血病、胃癌等肿瘤，而最常用的则用于抑菌。它对很多细菌如各种葡萄球菌、溶血性链球菌、白喉杆菌、霍乱孤菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、皮肤真菌、枯草杆菌、草分枝杆菌、淋球菌、炭宜杆菌、草状菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等均有抑制作用。其中对葡萄球菌、淋球菌、链球菌更为有效。本品对真菌、病毒、原虫也有效。同时，还具有利尿、利胆、解痉、降低血压抑制免疫功能等作用。

大黄素可用作泻药，虽有泻下活性，但由于体内易被氧化破坏，实际上泻下作用很弱，如与糖结合成苷类，则可发挥泻下作用。大黄素-1-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素葡萄糖苷者是大黄素与葡萄糖结合的苷，二者只是结合的位置不同，同时存在于大黄中。另有抗菌、止咳、抗肿瘤、降血压的功效。

大黄素是一种经基葱酮的衍生物，是荟大黄素、芦荟酸等葱酮类化合物，与浸渍法、回流提取法、超大黄的有效成分之一，存在于大黄、何首乌、决明子、首乌藤、虎杖等多种药材中，其药理作用广泛，具有较好的临床应用价值。

虎杖，中药名。为蓼科植物虎杖的干燥根茎和根。春、秋二季采挖，除去须根，洗净，趁鲜切短段或厚片，晒干。分布于西北、华东、华中、华南及西南等地。具有利湿退黄，清热解毒，散瘀止痛，止咳化痰的功效。用于湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，症瘕，趺打损伤，肺热咳嗽。

现有的大黄素提取大量使用苯等溶剂进行提取，这种方式不仅成本高昂，使用的试剂还为有挥发性和毒性的溶剂，对人身和环境均构成威胁。

发明内容

鉴于现有技术中所存在的问题，本发明公开了大黄素高纯度分离工艺，包括以下步骤：

步骤1，取2-5g虎杖粉，添加25-35ml蒸馏水，得混合物A；

步骤2，向所述步骤1中得到的混合物A中添加4-10mg酶，根据混合物A的体积控制酶含量为2mg/g，并酶解40-90分钟，得混合物B；

步骤3，将所述步骤2中得到的混合物B进行萃取和浓缩后，使用蒸馏水洗脱水溶性杂质，得产物C，提高大黄素产率；萃取采用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯无毒无污染；

步骤4，将所述步骤3中得到的产物C进行离心分离、干燥后得白藜芦醇粗品；

步骤5，将所述步骤4中得到的所述白藜芦醇粗品使用60％酒精溶解后过滤，得大黄素提取物；

步骤6，将所述步骤5中得到的大黄素粗提取物经层析柱层析后，使用乙醇溶液洗脱，将洗脱液收集减压蒸馏、重结晶，得大黄素精提取物。