[发明专利]一种紫杉醇分离纯化工艺

说明书

本发明涉及一种紫杉醇分离纯化工艺，涉及化合物分离纯化技术领域，解决了现有技术中紫杉醇分离提纯工艺中，提取纯度和生产效率低的问题；采用的有机溶剂品种相对较少，溶解剂与流动相中有相同的成分，且能够相互套用，操作灵活简便，降低了紫杉醇的分离提纯成本，且对紫杉醇的回收率较高，能够应用与大规模的紫杉醇分离提纯生产中；在层析柱底部设置流量阀，并控制流动相洗脱时的流速，便于紫杉醇的层析分离，提高提纯效果,既缩短了生产周期，简化了生产工艺，又减少了“溴加提纯工艺”中多次柱层析紫杉醇不可逆吸附造成的损失，提高了紫杉醇的收率，又大大降低了分离纯化成本。

技术领域

本发明涉及化合物分离纯化技术领域，具体为一种紫杉醇分离纯化工艺。

背景技术

紫杉醇，一种天然抗癌药物，分子式为C₄₇H₅₁NO₁₄，在临床上已经广泛用于乳腺癌、卵巢癌和部分头颈癌和肺癌的治疗。紫杉醇作为一个具有抗癌活性的二萜生物碱类化合物，其新颖复杂的化学结构、广泛而显著的生物活性、全新独特的作用机制、奇缺的自然资源使其受到了植物学家、化学家、药理学家、分子生物学家的极大青睐，使其成为20世纪下半叶举世瞩目的抗癌明星和研究重点。

分离提纯是指将混合物中的杂质分离出来以此提高其纯度。分离提纯作为一种重要的化学方法，不仅在化学研究中具有重要作用，在化工生产中也同样具有十分重要的作用。不少重要的化学研究与化工生产，都是以分离提纯为主体的。如石油工业等。

紫杉醇(paclitaxet)是从珍稀植物红豆杉中分离得到的二萜类化合物，其结构新颖，抗肿瘤机理独特，它可诱导和稳定微管聚合，阻止其解体，使癌细胞停止于G2/M，直至死亡。它抗癌范围广泛，特别对乳腺癌、卵巢癌有特效，该产品已于1992年通过了美国的FAD论证，因此成为当今世界公认的抗癌效果最好、活性最强的抗癌药物。然而，在实际药物生产中，紫杉醇的规模制备仍存在许多问题。首先，原料资源匮乏。紫杉醇主要存在于红豆杉树皮和针叶中，由于野生红豆杉植物生长非常缓慢，极少成林，资源十分有限，加之它具有独特的绿化观赏价值，因而国家将其列入一级保护值物，严禁砍伐、并禁止用于工业生产。其次，在植物中紫杉醇含量极低，大约为0.010％—0.013％，而紫杉醇与其它紫杉烷化合物的化学结构和极性极为相似，要将它们完全分离难度很大。紫杉醇的药用标准在98％以上(含量)，而目前国内分离纯化的技术工艺很难达到这一要求，即或部分生产企业分离纯化的产品能达到这一标准，但分离纯化的工艺复杂，成本也十分昂贵，亦严重制约了紫杉醇的工业化生产。

前我国北京、青岛、四川、湖南等很多省市已从美国、日本引进了一种能替代野生红豆杉的新品种蔓地亚红豆杉，且其紫杉醇含量远高于野生红豆杉植物，随着其近年来种植面积的不断扩大，有效的缓解了我国紫杉醇提取受原料制约的矛盾，因而在紫杉醇提取原材料已得到逐步解决的情况下，通过技术攻关，研究一种经济、合理、科学且能制取高纯紫杉醇产品的分离纯化工艺具有十分重要的意义。

目前也有人探索偿试用当前世界上植物提取中最先进的二氧化碳超临界萃取技术提取分离紫杉醇产品，由于在不同的压力、温度区间，二氧化碳对物质的选择具有不同的针对性，因而它可近乎百分之百地“榨取”中草药的有效成份。且无任何有害物质残留，同时还能将植物提取物中的耗氧微生物完全杀死，而生物活性物质不会被破坏，所以其提取纯度和生产效率很高。但该技术用于紫杉醇的提取尚在试验研究当中，提取工艺还未成熟，即或工艺技术成熟了，但它也只能用于紫杉醇产品的粗提，它在纯化过程中无法有效的将紫杉醇与三尖杉宁碱分开。

发明内容

鉴于现有技术中所存在的问题，本发明公开了一种紫杉醇分离纯化工艺，包含下述步骤：

步骤1，选用紫杉醇粗品作为原料，采用溶解剂对原料进行溶解，溶解剂与原料的重量比为1:5-12，制得样品；

步骤2，采用硅胶作固定相，硅胶与步骤1中制得的样品重量比为10：1-1.5；

步骤3，采用正己烷、二氯甲烷、丙酮、三乙胺、乙酸乙酯混合溶剂作为五元流动相；