[发明专利]一种羟丁基壳聚糖的纯化方法

说明书

本发明公开了一种羟丁基壳聚糖的纯化方法，包括以下步骤：1）将羟丁基壳聚糖混合物溶液加入到一定温度的纯水中，使混合物溶液与纯水的体积比为1:0.5‑1:100；2）搅拌，使羟丁基壳聚糖混合物溶液与纯水分散均匀，并使体系的最终温度保持在30℃‑70℃之间；3）静置，使沉淀析出，然后通过离心或过滤的方式将沉淀与溶液分离；4）取沉淀再次加入到纯水中，均匀分散；静置沉淀，再次通过离心或过滤的方式将沉淀与溶液分离；5）重复步骤4），直至离心后的上清液或过滤后的滤液电导率与所用纯水的电导率基本一致；6）干燥，获得高纯度的羟丁基壳聚糖。本发明采用价格低廉的纯水，避免使用大量有机溶剂，从而减少了需要处理的废液，并降低了生产过程中的安全隐患。纯化方法所需时间短，大大提高了分离纯化的效率，能制备出满足医用产品要求的高纯度羟丁基壳聚糖。

技术领域

本发明涉及一种温敏性壳聚糖衍生物的纯化方法，特别涉及一种温敏性羟丁基壳聚糖的纯化方法，属于生物医药技术领域。

背景技术

壳聚糖类材料经过数十年来不断的发展，已经发展到第三个阶段。

第一代壳聚糖材料为从虾、蟹等甲壳类动物的壳中提取的甲壳素和进一步脱乙酰基得到的壳聚糖。甲壳素不溶于一般的常用溶剂，壳聚糖可溶于部分稀酸溶液，但二者均不能溶于中性水溶液。

第二代壳聚糖材料为通过在甲壳素或壳聚糖的分子上接枝可溶性基团，使之变为水溶性材料，代表材料为羧甲基甲壳素和羧甲基壳聚糖等衍生物。该类材料解决了第一代壳聚糖材料不溶于水的问题，在医疗领域中，就解决了第一代壳聚糖材料的酸性溶液不能进入体内使用的问题，大大拓展了壳聚糖材料在人体上的应用。

第三代壳聚糖材料是通过在甲壳素或壳聚糖的分子上接枝智能基团使其成为智能壳聚糖生物材料，包括温度敏感型智能材料、pH敏感型生物材料、压力敏感型生物材料、磁性敏感型生物材料等。其中通过接枝羟丁基得到的羟丁基壳聚糖材料为至少具有温度敏感型的生物材料。羟丁基壳聚糖材料不仅解决了第一代生物材料的不溶于水的问题，还具有温度敏感特性。

到目前为止，在国家食品药品监督管理局注册的用于烧烫伤、创伤、手术切口等护理的壳聚糖类产品已有上百种，其中大部分以第一代壳聚糖材料为基础材料，这类材料制备方法相对简单、成本较低，但由于只能溶于部分酸溶液，不能用于体内，限制了其应用范围。

以第二代壳聚糖材料为基础材料的产品不足十个，这类材料克服了第一代材料不溶于水的缺点，可以在广泛的pH值范围内溶解，生物相容性良好，可以进入人体内使用，但在应用于人体后其溶液具有流动性，不能长期停留在病患部位发挥作用。

而以第三代壳聚糖为基础材料的产品目前仅有“温敏型羟丁基壳聚糖护创敷料”一个产品上市。该产品具有温度敏感性，即产品在低温下（低于其凝胶温度）为溶液状态，逐渐升温后，可在高于其凝胶温度后，如达到体温37℃后转变为不能流动的凝胶状态。这一特性使得该材料作用于病患部位后，可以长期固定并发挥作用。

温敏型羟丁基壳聚糖护创敷料在低温下具有良好的流动性，可以使用在几乎任何形状的创面，包括平面型、褶皱型、缝隙型等，使用后转变为不流动的凝胶贴附在创面上，不会因体位改变而流失，从而起到长期治疗的效果，解决了第二代羧甲基壳聚糖等材料流动性大，易离开需要屏障的创面部位的问题。因此，羟丁基壳聚糖材料具有良好的促进伤口愈合和止血性能。

公布号为CN 102276756 A的专利申请和公布号为CN 101284884 A专利申请均公开了从提取的壳聚糖经过进一步纯化后，通过碱化作用，再加入异丙醇、1,2-环氧丁烷等，通过常温、加热或微波作用一定时间得到含有羟丁基壳聚糖的混合物。此后，将所得的混合物用乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀，洗涤或离心，真空干燥，得到纯度很高的羟丁基壳聚糖。

公布号为CN 104761657 A的专利申请公开了一种通过相转变分离纯化羟丁基壳聚糖的方法，即将羟丁基壳聚糖溶液用不同浓度的氯化钠溶液沉淀后，再通过不同浓度的有机溶剂如乙醇、丙酮等进行脱盐、真空干燥，进而得到较纯的羟丁基壳聚糖。