[发明专利]一株金色链霉菌及其应用

说明书

本发明公开了金色链霉菌突变菌株及其选育方法以及优化的培养基。本发明的突变株能高效合成和积累金霉素、杂质四环素和去甲基金霉素含量显著降低，遗传稳定性良好，连续传代五代其形态、颜色、产金霉素水平以及主要杂质的含量基本稳定，能够应用于工业化发酵生产及作为进一步研究开发的生产菌株。本发明优化的培养基，有利于促进金霉素的合成与积累，进一步减少杂质四环素和去甲基金霉素的比例。本发明基于多重复合诱变和前体/产物耐受构建了高产菌株选育模型，不仅突变库的多样性更高，而且简便快捷，提高了筛选效率并减少了筛选工作量，对金霉素及其他链霉菌来源抗生素的生产成本降低和产能提高都具有一定的应用价值和指导意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种金霉素产量高、杂质比例低的金色链霉菌突变菌株及其应用。

背景技术

金色链霉菌(Streptomyces aureofaciens)作为重要的药用微生物，属于高度好氧、革兰氏染色阳性的放线菌。然而，目前发酵生产金霉素的菌株效价不高，而且生产稳定性不好，严重影响了金霉素的发酵指数和生产效益。为了建立优化、经济和具有竞争性的金霉素生物生产工艺，必须充分考虑生产水平、发酵方式、后处理精制等一系列问题。其中，获得所需特性、且合适的高效生产菌株对于金霉素的发酵生产来说是至关重要的，也是整个金霉素发酵工业的核心。因此，选育高产、稳定的金霉素菌种一直是金霉素发酵工业技术开发和发酵工程化研究的热点，并且也将一直伴随金霉素发酵产业的发展。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种金霉素产量高、杂质比例低的金色链霉菌突变菌株，选育该突变菌株的方法，以及利用该突变菌株制备高产量的金霉素的方法。所要解决的技术问题不限于如所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了一种制备金色链霉菌培养物的方法，所述方法包括在培养基中培养金色链霉菌，得到金色链霉菌培养物；

所述金色链霉菌为金色链霉菌(Streptomyces aureofaciens)，其菌株号为FJW-507，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2021500。

上述方法中，所述培养基包括种子培养基和/或发酵培养基，所述种子培养基和发酵培养基含有氯化铵、氯化钙和氯化镁。

上述方法中，所述种子培养基的组成可为：玉米淀粉30.0g/L，黄豆饼粉15.0g/L，花生饼粉10.0g/L，氯化钠3.0g/L，氯化铵4.0g/L，氯化钙1.2g/L，碳酸钙1.8g/L，蛋白胨5.0g/L，酵母粉5.0g/L，氯化镁0.05g/L，硫酸镁0.05g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，豆油1.0g/L，其余为水。

上述方法中，所述发酵培养基的组成可为：玉米淀粉60.0g/L，花生饼粉25.0g/L，玉米粉20.0g/L，黄豆饼粉10.0g/L，蛋白胨10.0g/L，酵母粉5.0g/L，玉米浆10.0g/L，氯化钠2.0g/L，氯化铵4.0g/L，氯化钙2.0g/L，碳酸钙3.0g/L，氯化镁0.1g/L，硫酸镁0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，淀粉酶1.0g/L，豆油20.0g/L，其余为水。

上述方法中，所述培养基还包括孢子培养基，所述孢子培养基由等质量的麸皮与营养液组成，所述营养液的组成可为：玉米淀粉30.0g/L，花生饼粉2.0g/L，酵母粉5.0g/L，蛋白胨3.0g/L，氯化铵2.0g/L，氯化钠2.0g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，氯化镁0.15g/L，硫酸镁0.15g/L，其余为水。

本发明还提供了金色链霉菌(Streptomyces aureofaciens)，其菌株号为FJW-507，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2021500。以下简称为金色链霉菌FJW-507。

所述金色链霉菌FJW-507也在本发明保护的范围内。