[发明专利]一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法在审
申请号: | 202110896231.5 | 申请日: | 2021-08-05 |
公开(公告)号: | CN113624959A | 公开(公告)日: | 2021-11-09 |
发明(设计)人: | 李倩;张西亚;丁明月;毛烨炫;方东来 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
代理公司: | 北京专赢专利代理有限公司 11797 | 代理人: | 陈进 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 林可霉素 胶体 试纸 制备 方法 | ||
1.一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
制备胶体金:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金;金标抗体的pH调节;金标抗体的pH的进一步优化;抗原优化;抗原加标优化确定试纸条。
2.如权利要求1所述的一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,所述制备胶体金的操作步骤如下:
先用双蒸馏水将1%的氯金酸稀释100倍,再取100mL稀释液用恒温电磁搅拌器将溶液加热至沸腾,在持续搅拌下迅速加入2.5mL的1%柠檬酸三钠溶液,当溶液颜色呈现出均匀的酒红色时停止搅拌加热,冷却至20℃后再用双蒸馏水将溶液定容至100mL,将制备好的胶体金溶液放于4℃、避光的条件下保存。
3.如权利要求2所述的一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,所述金标抗体的pH调节的操作步骤为:先将抗体溶液稀释100倍备用;向胶体金溶液中加入0μL、5μL、10μL、15μL、20μL、25μL、30μL的0.1moL/L的K2CO3溶液,充分混匀后静置,再加入所述稀释后的抗体溶液,进行混匀,静置,采用BSA溶液选择金标抗体1。
4.如权利要求3所述的一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,所述采用BSA溶液选择金标抗体溶液的操作步骤为:静置完成后再加入20μL的BSA溶液对其进行封闭,观察溶液的颜色,使溶液颜色保持不变的K2CO3用量为最佳用量,选取颜色接近的K2CO3的金标抗体1。
5.如权利要求4所述的一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,所述金标抗体的pH的进一步优化的操作步骤为:选取颜色接近的K2CO3的金标抗体溶液,在抗原稀释10倍、二抗稀释3倍的条件下,制做试纸条1,向制做出的两种试纸条1中分别加入2μL、4μL、6μL的金标抗体,添加完成后静置6min,根据其显色结果,选取显色深的金标抗体2。
6.如权利要求5所述的一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,所述抗原优化的操作步骤为:在抗原稀释10倍,二抗稀释3倍的条件和抗原稀释5倍,二抗稀释3倍的条件下,制备出两种试纸条2,向试纸条2分别加入2μL、4μL、6μL的抗原,静置6min后,察看试纸条显色情况,确定优化抗原。
7.如权利要求6所述的一种可快速检测林可霉素的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,所述抗原加标优化确定试纸条的操作步骤为:将所述优化抗原稀释10倍和抗原稀释5倍,添加所述金标抗体2条件下,制备出两种试纸条3,检测0ng/mL、2ng/mL、10ng/mL的林可霉素标准品,观察显色结果,确定试纸条产品。
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