[发明专利]一种用于评价特发性非梗阻性无精子症患者睾丸显微取精效果的试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种用于评价特发性非梗阻性无精子症患者睾丸显微取精效果的试剂盒，所述试剂盒所含试剂通过测定精浆中hsa_circ_0000277、hsa_circ_0060394、hsa_circ_0007773这三种circRNAs的含量，利用逻辑回归将三个circRNAs联合构建一个具有更高的诊断价值的模型，用于评价特发性非梗阻性无精子症患者睾丸显微取精效果。本发明的有益效果在于：精浆中的睾丸来源的circRNA表达稳定，取材方便，可以用于动态反映睾丸内部的生精状态。经临床标本验证，精浆中睾丸来源的circRNA作为特发性NOA患者显微取精效果的评价标志物具有很高的诊断性价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种用于评价特发性非梗阻性无精子症患者睾丸显微取精效果的cirRNA标志物。

背景技术

无精子症是指患者连续三次射出的精液中都没有发现精子的一种状况，是男性不育的主要原因。根据睾丸是否具有生精功能，无精子症可分为两类：梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)和非梗阻性无精子症(Non-obstructive azoospermia,NOA)。目前，特发性NOA的发病原因尚不清楚，且发病人数日益增多。对于患有特发性NOA的患者，通过手术获得精子是帮助他们实现生育的唯一方法。

1993年，Craft等人第一次用睾丸切开取精术(testicular sperm extraction,TESE)为OA患者获得精子。自此以后，多种外科手术方法被开发用于无精子患者的治疗，包括经皮附睾精子抽吸术(percutaneous epididymal sperm aspiration,PESA)，睾丸精子抽吸术(testicular sperm aspiration,TESA)，TESE和睾丸显微取精术(microdissectiontesticular sperm extraction,micro-TESE)。其中，micro-TESE被临床医生认为是NOA患者的最佳手术选择。

与其他手术方法相比，micro-TESE具有明显的优势，如更小的手术创伤，更高的精子获取率和更少的术后并发症。然而，对于特发性NOA的患者，micro-TSES的成功精子获取率仍然不是很高。因此，有必要找到一种准确的标记物来筛选适合手术取精的患者。

在过去的几十年中，研究人员研究了临床指标(包括病因、年龄、睾丸体积、精液体积等)、实验室指标(包括促卵泡激素(FSH)、抑制素B、睾酮(T)、病理情况等)、辅助疗法和外科手术术式，以探索对NOA具有较高诊断性能的评价因子。然而，现有的变量始终不能很好地评价NOA患者的手术取精效果。此外，很少有研究提高特发性NOA患者中micro-TESE取精效果的研究。

环状RNA(circRNA)是通过前体RNA的从尾到尾的反向剪切形成的共价闭环结构。CircRNA不受RNA核酸外切酶的影响，因此在多种体液(血液、唾液、精液等)中保持稳定。而且，circRNA在不同的细胞和物种之间是高度保守的。血液中的CircRNA已成功用于某些疾病(包括肿瘤，精神分裂症，糖尿病等)的早期诊断。

已有研究表明，精浆中可以稳定地检测到睾丸来源的circRNA。此外，这些人类睾丸来源的circRNA在室温下非常稳定。因此，我们的研究旨在探讨精浆中睾丸来源的circRNA在提高特发性NOA患者micro-TESE效果方面的潜在价值。

发明内容

本发明要解决的问题是：提供一种用于评价特发性非梗阻性无精子症患者睾丸显微取精效果的试剂盒，该试剂盒基于cirRNA标志物，用于提高特发性非梗阻性无精子症患者在显微取精手术中的取精效率。