[发明专利]一种可填充用的丝素蛋白凝胶的制备及应用

说明书

本发明公开了一种可填充用的丝素蛋白凝胶的制备方法，主要包括以下步骤：称取一定质量的丝素蛋白于圆底烧瓶中，加入一定量的纯化水使得丝素蛋白浓度为30‑50mg/mL，机械搅拌1‑10min后，边搅拌边加入一定量的氯化钠和利多卡因，继续搅拌30‑120min后，得到充分溶解的丝素蛋白凝胶。该凝胶制备工艺简单、浓度高、填充效果好，安全性高、其作为填充剂时更易于通过注射器回收。

技术领域

本发明属于生物医用领域，具体为一种可填充用的丝素蛋白凝胶的制备及应用。

背景技术

蚕丝由丝素蛋白和丝胶蛋白构成，属于天然蛋白纤维。其中丝素蛋白占蚕丝整体质量的75％左右，富含18种氨基酸，具有良好的力学性能、生物相容性、可降解性。研究表明，丝素蛋白在单独使用时，不会诱导免疫反应，在生物医用领域具有深远的应用前景。从物理性能看，丝素蛋白在可控条件下可以实现水溶性与非水溶性的双向转化的特点，使其可通过不同工艺溶解再生成特定形态的生物医用材料，如微球、纤维膜、凝胶等，可广泛应用于药物载体、伤口敷料、皮肤填充材料或其他组织工程方面。

注射填充用丝素蛋白水凝胶在医学美容领域具有可观的应用前景。凝胶是由亲水的高分子化合物通过物理或者化学方法制得的一种三维网络聚合物。其相互连通的多孔结构为细胞的迁移和增殖提供了良好的环境，可以实现组织的原位再生及重建。此外，丝素蛋白在人体内会逐渐降解，此过程主要由蛋白酶介导，降解产物多肽可由细胞完全代谢，对人体无毒副作用。当下，提高注射用丝素蛋白凝胶的填充效果和使用安全性具有重要的现实意义。

当前，虽然已经公开了一些丝素蛋白凝胶技术，但都是通过新鲜的丝素蛋白溶液制备而成，将冷冻干燥后的丝素蛋白直接完全溶解是一个技术难题。专利号CN 103289107A公开了一种可注射丝素蛋白原位凝胶的制备方法及其应用，将质量分数为3-30％的丝素蛋白水溶液与质量分数为50-100％的聚乙二醇或丙二醇溶液进行混合，两者体积比为2:1-1:2，该共混液经1-10min凝固形成丝素蛋白凝胶。专利号CN 112574436 A公开了一种丝素蛋白和聚多巴胺的复合凝胶的制备方法，将脱胶丝素蛋白、氯化钙和甲酸混合加热溶解后得到丝素蛋白溶液，待溶液冷却至室温20-25℃并静置至甲酸挥发完，得到丝素蛋白凝胶。以上技术都利用丝素蛋白溶液去制备凝胶，这涉及到溶液的制备及存储问题，故将冻干后的丝素蛋白直接溶解成凝胶具有重要的现实意义。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种可填充用的丝素蛋白凝胶的制备方法，采用简单的工艺配方将再生高分子丝素蛋白制备成生物相容性良好的凝胶。

一种可填充用的丝素蛋白凝胶的制备方法，主要包括以下步骤：

称取一定质量的丝素蛋白于圆底烧瓶中，加入一定量的纯化水使得丝素蛋白浓度为30-50mg/mL，机械搅拌1-10min后，边搅拌边加入一定量的氯化钠和利多卡因，继续搅拌30-120min后，得到充分溶解的丝素蛋白凝胶。

优选方案为，氯化钠浓度为0.5％-1.5％，氯化钠与利多卡因的质量比为1:1-10:1。

优选方案为，所述丝素蛋白呈絮状，分子量达200万以上，采用碱法脱胶和离子液体溶解法制备而得。

优选方案为，所述碱法脱胶和离子液体溶解法的具体步骤为：将蚕茧剪碎放入三口烧瓶中，再放入质量分数为2g/L的碳酸氢钠溶液，控制浴比为1:100，煮沸并冷凝回流30min，最后用温和的蒸馏水水洗至没有滑腻感，烘干后得到丝素蛋白；将质量分数为1％的丝素蛋白加到1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐离子液体中，油浴加热并磁力搅拌至丝素蛋白完全溶解后得到离子液体溶液；经超声后，快速离心除去未溶解的杂质得到丝素蛋白透明溶液，再加入一定量的纯化水至丝素蛋白完全析出，水洗后放入电热鼓风干燥箱中干燥12h得到超纯高分子丝素蛋白。

上述任一制备方法所得到的丝素蛋白凝胶在填充材料领域的应用。

与现有技术相比，本发明的特点和有益效果是：