[发明专利]一种抑制Notch和NF-κB信号激活的嵌合诱骗寡核苷酸及其应用

说明书

本发明涉及一种抑制Notch和NF‑κB信号激活的嵌合诱骗寡核苷酸及其应用，该嵌合诱骗寡核苷酸是由2个RBPJ特异性识别位点、1个NF‑κB特异性识别位点组成的单链，其序列为：5’‑TCGTGGGAATTTCCCACGCTAGTTTTTCTAGCGTGGGAAATTCCCACGA‑3’，序列两端进行硫代修饰，退火后形成发卡样双链结构。所述嵌合诱骗寡核苷酸进入细胞后能竞争结合Notch信号的关键转录因子RBPJ，抑制Notch信号的激活，同时还能竞争结合p65/NF‑κB，抑制NF‑κB信号的激活，因此可应用于体外和体内研究Notch/NF‑κB信号对细胞增殖、分化和凋亡等的影响，以及治疗Notch和NF‑κB信号同时异常激活的急性T淋巴细胞白血病等恶性肿瘤。

技术领域

本发明涉及诱骗寡核苷酸及其应用，尤其是一种抑制Notch和NF-κB信号激活的嵌合诱骗寡核苷酸及其应用，具体是转录因子免疫球蛋白Kappa J区重组信号结合蛋白(以下简称RBPJ)和B细胞Kappa轻链基因增强子结合核因子(以下简称NF-κB)嵌合诱骗寡核苷酸及其在抑制Notch和NF-κB信号激活中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

Notch信号途径是进化上高度保守的信号途径，介导相邻细胞间直接的信号转导，广泛参与细胞命运决定、细胞增殖、分化和凋亡等，在血管生成、肿瘤发生发展等方面发挥重要作用。Notch信号途径由配体、受体、下游信号转导分子和核内应答过程组成。目前在哺乳动物中共发现了5种Notch配体(Jagged1、Jagged2、Delta-like 1、Delta-like 3和Delta-like4)、4种Notch受体(Notch1-4)。当相邻细胞间配体与受体结合后，通过γ分泌酶复合物酶切，释放胞内段NICD(Notch的活性形式)，它能进入细胞核，与转录因子RBPJ结合，使RBPJ由转录抑制状态变成活化状态，募集共激活因子Mastermind-like等，结合特异的DNA序列(C/TGTGGGAA)，激活下游Hes1等基因的表达。RBPJ是Notch四种受体的共同下游转录因子，RBPJ的阻断或抑制能有效阻断经典的Notch信号(Artavanis-Tsakonas S等,Science,1999,284:770-6；Borggrefe T等,Cell Mol Life Sci,2009,66:1631-46；HighFA等,Nat Rev Genet,2008,9:49-61)。

NF-κB信号广泛参与调控免疫和炎症反应、细胞存活、增殖、分化和凋亡等，在多种疾病中NF-κB信号持续激活，如肿瘤、关节炎、哮喘、神经退行性疾病和心脏病等。目前哺乳动物中NF-κB家族成员主要包括RelA(p65)，RelB，c-Rel，NF-κB1(p50/p105)和NF-κB2(p52/p100)，它们的N末端都存在一个高度保守的Rel同源结构域，两种相同或不同的NF-κB成员组成同二聚体或异二聚体，其中p65与p50形成的异二聚体最为常见。静息状态时NF-κB与其抑制蛋白IκB结合，以无活性的形式位于胞浆中，而当细胞受到刺激后IκB被其激酶(IKK)磷酸化，并快速发生泛素化-降解，NF-κB与IκB解离并暴露核定位信号，进入细胞核与染色体DNA上的特异序列GGGRNWYYCC(R:A/G,W:A/T,Y:C/T)结合，激活下游多种靶基因的表达，如Bcl2，Bcl-Xl，c-Myc，IL8，VEGF等(Zhang Q等,Cell,2017,168:37-57；Hayden MS等,Cell,2008,132:344-62)。