[发明专利]一种(R)-3-氨基丁酸的合成与纯化方法

权利要求书

1.一种氨基转移酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

2.一种核酸，其编码权利要求1所述的氨基转移酶。

3.如权利要求2所述的核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

4.一种载体，其含有权利要求2或3所述的核酸。

5.如权利要求4所述的载体，其特征在于，所述载体选自下组中的一种：质粒、噬菌体、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒或逆转录病毒。

6.如权利要求4所述的载体，其特征在于，在所述载体中，所述核酸的表达受到转录调控，在缺少相应诱导剂的情况下，所述核酸的表达被阻遏；在存在所述诱导剂的情况下，所述核酸能够表达。

7.一种宿主细胞，其表达权利要求1所述的氨基转移酶，和/或含有权利要求2或3所述的核酸，和/或含有权利要求4-6任一项所述的载体。

8.如权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为原核细胞、酵母细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞。

9.如权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为氨基转移酶工程菌，其中，所述核酸的序列如SEQ ID NO：3所示，所述载体为质粒为pET30a，所述宿主细胞为E.coli BL21(DE3)。

10.权利要求1所述的氨基转移酶，和/或权利要求2或3所述的核酸，和/或权利要求4-6任一项所述的载体，和/或权利要求7-9任一项所述的宿主细胞在制备(R)-3-氨基丁酸中的应用。

11.一种(R)-3-氨基丁酸的制备方法，其特征在于，其包括：以巴豆酸为底物，以表达有权利要求1所述的氨基转移酶的宿主细胞作为催化剂，合成(R)-3-氨基丁酸。

12.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述表达有权利要求1所述的氨基转移酶的宿主细胞的制备方法包括：在适于表达权利要求1所述的氨基转移酶的条件下，培养权利要求7-9任一项所述的宿主细胞。

13.如权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述培养为发酵。

14.如权利要求12所述的制备方法，其特征在于，在所述宿主细胞中，所述核酸的表达受到转录调控，在缺少相应诱导剂的情况下，所述核酸的表达被阻遏；在存在所述诱导剂的情况下，所述核酸能够表达；培养所述宿主细胞的步骤包括：

S1：将所述宿主细胞接种于液体培养基中，培养至对数生长期，获得菌液；

S2：取步骤S1所得菌液，按接种量5％-10％转接于发酵培养基中，培养过程中流加补料培养基，培养至对数生长中后期；

S3：向步骤S2获得的培养液中加入所述诱导剂进行诱导表达。

15.如权利要求14所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述宿主细胞为大肠杆菌；所述液体培养基为TB肉汤液体培养基；所述培养温度为30-37℃。

16.如权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的组分包括：蛋白胨20-30g/L，酵母粉20-30g/L，甘油40-50g/L，Na₂HPO₄ 15-20g/L，KH₂PO₄ 5-10g/L，无水硫酸镁0.5-1g/L，NaCl 8-12g/L。

17.如权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述补料培养基的组分包括：甘油40-60％(v/v)，蛋白胨30-50g/L，酵母粉30-50g/L。