[发明专利]果糖胺脱糖酶载体、表达果糖胺脱糖酶的转基因细胞系和基因工程菌及果糖胺脱糖酶的应用在审
| 申请号: | 202110872810.6 | 申请日: | 2021-07-30 |
| 公开(公告)号: | CN113584007A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
| 发明(设计)人: | 王怀英 | 申请(专利权)人: | 武汉百氨汇基生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/78 | 分类号: | C12N9/78;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/40;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
| 地址: | 430074 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 果糖 胺脱糖酶 载体 表达 转基因 细胞系 基因工程 应用 | ||
1.一种催化氨基由氨基供体化合物转移至氨基受体化合物的方法,其特征在于,所述方法包括:利用酶,或者表达所述酶的表达载体或克隆载体、或者表达所述酶的转基因细胞系、或者表达所述酶的基因工程菌,催化氨基由氨基供体化合物转移至氨基受体化合物;所述酶含有:
1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或者,
2)在所述SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上经氨基酸的缺失、取代、插入或突变而成且具有催化氨基由氨基供体化合物转移至氨基受体化合物的活性的酶的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述氨基供体化合物包括氨基酸。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述氨基受体化合物包括糖类。
4.果糖胺脱糖酶在生产氨基葡萄糖和/或酮基羧酸中的应用,所述果糖胺脱糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.一种生产氨基葡萄糖和/或酮基羧酸的方法,其特征在于,所述方法包括:
利用果糖胺脱糖酶、或者表达所述果糖胺脱糖酶的表达载体或克隆载体、或者表达所述果糖胺脱糖酶的转基因细胞系、或者表达所述果糖胺脱糖酶的基因工程菌,以氨基酸和糖类作为反应底物,进行氨基转化,得到氨基葡萄糖和/或酮基羧酸;所述果糖胺脱糖酶的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述糖类包括淀粉、葡萄糖、果糖、果糖-6-磷酸中的一种或两种以上。
7.根据权利要求5或6所述的应用,其特征在于,所述氨基酸包括丙氨酸,谷氨酸,天门冬氨酸或谷氨酰胺。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述氨基转化的条件包括:pH值为6~8,温度为30~50℃。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法中用到的酶还包括果糖激酶,所述果糖激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
10.一种果糖胺脱糖酶的载体,其特征在于,所述载体包括骨架载体和编码果糖胺脱糖酶的基因;所述编码果糖胺脱糖酶的基因的核苷酸如SEQ ID NO.2所示。
11.一种表达果糖胺脱糖酶的转基因细胞系,编码果糖胺脱糖酶的基因的核苷酸如SEQID NO.2所示。
12.一种表达果糖胺脱糖酶的基因工程菌,编码果糖胺脱糖酶的基因的核苷酸如SEQID NO.2所示。
13.基于权利要求12所述基因工程菌的果糖胺脱糖酶的生产方法,包括以下步骤:将所述基因工程菌进行液体培养,诱导,得到果糖胺脱糖酶。
14.一种联产氨基葡萄糖和酮基羧酸的复合酶,其特征在于,所述复合酶包括果糖胺脱糖酶和果糖激酶;所述果糖胺脱糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述果糖激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
15.基于权利要求14所述复合酶的联产氨基葡萄糖和酮基羧酸的方法,包括以下步骤:将果糖和果糖激酶混合进行磷酸化,得到果糖-6-磷酸;将果糖-6-磷酸、氨基酸和果糖胺脱糖酶混合,进行氨基转移,得到氨基葡萄糖和酮基羧酸。
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