[发明专利]一种诱导培养基及诱导获得癌细胞持续感染NDV的方法

权利要求书

1.一种诱导培养基，其特征在于，是由以下成分组成：DMEM高糖培养基、胎牛血清、β-巯基乙醇、维生素A、N2细胞培养添加剂、B27细胞培养添加剂；

所述诱导培养基用于诱导食管癌细胞和胃癌细胞持续感染NDV。

2.根据权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基中胎牛血清的体积比浓度为12.5%。

3.根据权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基中β-巯基乙醇的浓度为1mmol/L。

4.根据权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基中维生素A的浓度为1µmol/L。

5.根据权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基中N2细胞培养添加剂的体积比浓度为1％。

6.根据权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基中B27细胞培养添加剂的体积比浓度为1％。

7.根据权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于，所述诱导培养基的培养方法包括以下步骤：

71取DMEM高糖培养基800ml， 向其中加入胎牛血清125ml、β-巯基乙醇7µL、维生素A2.865mg、N2细胞培养添加剂10ml、B27细胞培养添加剂10ml,然后定容至1L，得到混合液；

72混合液无菌过滤，得到诱导培养基。

8.一种诱导获得癌细胞持续感染NDV的方法，其特征在于，是使用如权利要求1-6任一项所述的诱导培养基，所述癌细胞为食管癌细胞或胃癌细胞，并包括以下步骤：

81细胞消化后，用所述诱导培养基重悬细胞并接种至细胞培养板；

82待细胞贴壁后，换取无血清DMEM高糖培养基，感染NDV，30min后继续换上所述诱导培养基诱导培养；

83待3-5天，换取一次诱导培养基，之后，若pH发生变化，则根据细胞量更换诱导培养基，将细胞扩增起来培养，即获得持续感染的癌细胞。

9.根据权利要求8所述的诱导获得癌细胞持续感染NDV的方法，其特征在于：步骤82中NDV为La Sota株。