[发明专利]一种利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法

权利要求书

1.利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）油茶粕的脱毒处理

利用黑曲霉于28～32℃发酵2～3天，之后于32～38℃继续发酵1～3天后，共发酵4～6天，之后进行蒸汽爆破处理，得到脱毒油茶粕粉末；将脱毒油茶粕粉末与水混合，灭菌后得油茶粕液体培养基；

（2）发酵菌株的活化培养

将保藏编号为CGMCC2275的红曲霉突变菌株作为发酵菌株进行固体斜面活化培养，用无菌水或生理盐水收集孢子备用，作为液体发酵的发酵菌剂；

（3）配置混合发酵培养基

将步骤（1）制得的油茶粕液体培养基与液体发酵培养基按体积比3～7:10 L/L混合，即制得混合发酵培养基；其中，所述液体发酵培养中的氮源为酵母粉，牛肉膏，蛋白胨，硝酸钠，氯化铵，硝酸铵，磷酸二氢铵，硫酸铵，磷酸氢二铵中的一种或几种，浓度为5～20 g/L；液体发酵培养基使用的碳源为可溶性淀粉和葡萄糖，浓度分别为40 g/L、20 g/L；

（4）液体发酵

于步骤（3）制得的混合发酵培养基中接种步骤（2）制得的发酵菌剂进行液体发酵，收集发酵液过滤即得胞外水溶性黄色素。

2.如权利要求1所述的利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，蒸汽爆破处理的条件为：在2～5 MPa的压力下用蒸汽将发酵后油茶粕加热到100～150℃，维持2～10min，然后瞬间减至常压。

3.如权利要求1所述的利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，脱毒油茶粕粉末与水按照料液质量比1:5～20 kg/kg混合。

4.如权利要求1所述的利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，固体斜面活化培养的培养基为PDA或麦芽汁琼脂培养基，培养时间3天。

5.如权利要求1所述的利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，液体发酵培养基使用的氮源采用有机氮源，即酵母粉，牛肉膏，蛋白胨中的一种或几种。

6.如权利要求1所述的利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于，所述步骤（4）中，液体发酵的条件为：发酵温度30～35℃，搅拌转150～250 rpm，发酵第1～3天控制溶氧量为60%，之后控制溶氧量为30%，发酵总时间为9～12天。

7.如权利要求1所述的利用油茶粕发酵制备胞外水溶性黄色素的方法，其特征在于，所述胞外水溶性黄色素的最大吸收峰波长为370 nm，pH适应范围为1～14。