[发明专利]用于检测SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的纳米颗粒溶液、制备方法、试剂盒及应用

说明书

本发明公开了病毒抗体检测技术领域。尤其涉及一种用于检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2抗体的试剂盒，基于抗原‑抗体免疫识别反应，纳米颗粒载体与光敏水凝胶的SARS‑CoV‑2冠状病毒Spike蛋白的快速检测试剂。本发明提供的用于新型冠状病毒S蛋白的检测试剂，借助现有S蛋白核酸序列，构建针对2019‑nCoV的S蛋白纳米抗体识别复合物，可特异性的识别和鉴定新型冠状病毒特有的S蛋白。将光敏水凝胶技术与免疫识别纳米技术相结合，将病毒识别信号转化和呈现为可视的理化现象，从而实现快速的筛查和判断。

技术领域

本发明属于病毒抗体检测技术领域，尤其涉及一种用于检测新型冠状病毒 SARS-CoV-2的试剂，具体的为检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)Spike蛋白抗原的纳米颗粒，更具体的涉及一种基于抗原-抗体免疫识别反应、纳米颗粒载体及光敏催化反应的SARS-CoV-2冠状病毒Spike蛋白的快速检测试剂盒。

背景技术

SARS-CoV-2冠状病毒感染过程是由其表面的Spike蛋白(S蛋白)与宿主细胞表面的血管紧张素转换酶2(ACE2)的相互识别开启的，Spike蛋白是一类三聚体跨膜糖蛋白，在病毒表面形成特殊的花冠结构。冠状病毒进入易感细胞是一种复杂的过程，需要S蛋白的受体结合和蛋白水解过程协同作用以促进病毒-细胞融合。由于S蛋白暴露于病毒表面并介导病毒进入宿主细胞，因此它是感染后中和抗体的主要靶标，可作为SARS-CoV-2冠状病毒的抗原，是抗病毒药物、治疗性抗体、诊断方法等开发的关键靶标，发挥着无可替代的作用。然而，利用基于S蛋白免疫识别的检测技术还需进一步将该识别信号转化和呈现为可见的理化现象，从而实现快速筛查和判断。

世界各国的研究者们正在研究快速而准确的新型冠状病毒检测方法，基于 PCR技术(分子测试)的核酸检测试剂的发挥了重要作用，但该检测手段存在几个问题：

一是由于SARS-CoV-2冠状病毒为RNA病毒，检测需要依次完成样本处理、集中送检等复杂流程，总耗时超过1个小时，不能满足快速、高通量的检测需求，如果对于所有的求医人员都只采用核酸检测，对于一些医疗系统不够完善的地区，容易造成医疗拥挤，导致部分患者迟迟无法确诊，延误治疗或导致疫情扩大化；

二是核酸检测需要专业人员进行，且需要较高的实验室条件；

三是部分无症状感染者由于带毒量较低，或由于样品采集和处理的原因，会产生假阴性结果。因此，急需继续研发具有更高灵敏度、更短检测时间和更方便操作方法的检测技术。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中所存在的检测耗时较长，检测过程复杂以及检测灵敏度不高的技术缺陷，提供一种用于检测SARS-CoV-2冠状病毒S 蛋白的纳米颗粒溶液、试剂盒。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

一种用于检测SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的纳米颗粒溶液，所述纳米颗粒溶液包括纳米颗粒载体、所述纳米颗粒载体上负载有S蛋白克隆抗体和光敏催化剂。

本发明公开的一种纳米颗粒溶液，借助纳米颗粒这个载体，纳米颗粒表面可以提供偶联位点，将能特异性识别S蛋白克隆抗体和光敏催化剂共同偶联于纳米粒子上，即利用纳米颗粒作为介质，可将光敏水凝胶技术与免疫识别纳米技术完美结合。利用新型冠状病毒S蛋白与S蛋白克隆抗体的特异识别反应，使纳米颗粒牢固的附着在具有新型冠状病毒S蛋白的物质上，再利用光敏水凝胶能引发凝胶固化的特性，即可将病毒识别信号转化和呈现为可见的理化现象，因为光敏催化剂发生固化的过程快速，且固化反应前后溶液状态明显。从而实现快速筛查和判断。更加易于操作，极大的提高了检测效率，减少了病毒传播的风险。

作为本发明的优选技术方案，所述纳米颗粒载体由聚合物A和聚合物B交联而成，所述聚合物A为甲氧基聚乙二醇-聚己内酯聚合物(mPEG-PCL)，所述聚合物B为马来酰亚胺-聚乙二醇-聚己内酯聚合物(Mal-PEG-PCL)。

mPEG-PCL的结构式如下所示：