[发明专利]一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂及制备方法

说明书

本发明提供一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂，以氯仿为溶剂，每20～25mL氯仿含有4,4'‑二氨基二苯甲烷10～15g、乙酰乙酸乙酯铜10～15g、海藻酸钠聚合物2～5g和聚乙烯吡咯烷酮5～8g。本发明制备的检测试剂可直接用于检测橡胶树树皮的HCN含量，该检测试剂具有检测时间快、结果准确、操作简单、成本低等优点，可适用于大量橡胶树树皮的氰化氢含量的检测。

技术领域

本发明涉及生物化学检测技术领域，特别涉及一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂及制备方法。

背景技术

天然橡胶在弹性、耐磨性和延展性等方面具有合成橡胶不可替代的优势，在一些重要工业领域(如航空、航天和重型汽车等制造业)具有广泛的应用。巴西橡胶树(Heveabrasiliensis，简称橡胶树)是天然橡胶的主要来源。巴西橡胶树是大戟科植物，也是我国热带地区主要的经济作物。巴西橡胶树传统育种周期约为30年，早期产量预测是缩短育种周期的关键。死皮(tapping panel dryness)是限制橡胶树产量的主要因子。据统计，我国主要植胶区域死皮累计发生率在20％～40％之间，严重地区在50％以上，每年因橡胶树死皮而造成的直接经济损失高达30亿元。此外，随着高产无性系和乙烯利刺激采胶技术的推广，橡胶树死皮发生率和严重程度呈逐年上升趋势。因此，对死皮发生进行早期预测，及时进行预防和干预是目前降低死皮危害的最有效手段。

巴西橡胶树是典型的产氰植物，当橡胶树出现死皮症状时，树干树皮组织释放的HCN含量较高，即HCN与死皮发生有关。因此，可通过检测树皮组织中的HCN对死皮进行早期的预测。采用HCN试纸可直接检测橡胶树叶，测定树叶中的HCN含量，而橡胶树的树皮内部组织不同于橡胶树叶，其存在多种层次结构，同时具有较深的颜色，HCN试纸检测并不适用于检测橡胶树树皮的HCN含量，易造成检测结果不准确，因此，需要制备一种适用于橡胶树树皮HCN含量检测的检测试剂，对实现橡胶树死皮进行早期的准确预测提供重要基础。

发明内容

鉴以此，本发明的目的在于提供一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂及制备方法，本发明制备的HCN检测试剂直接滴加至橡胶树树皮，即可完成HCN含量的检测，该检测试剂具有检测时间快、结果准确、操作简单、成本低等优点。

本发明的技术方案是这样实现的：

4,4'-二氨基二苯甲烷和乙酰乙酸乙酯铜可与氰化氢发生反应，形成有颜色的化合物，因此可用于检测物质中氰化氢的含量，化学反应方程式如下：

2CuAc₂+C₁₇H₂₂N₂+2HCN→2CuCN+[C₁₇H₂₁N₂]Ac+3HAc

树皮由外向内分为外表皮、形成层和韧皮部等多层次组织结构，海藻酸钠聚合物可使检测试剂的成分形成交联互穿网络，聚乙烯吡咯烷酮可去除树皮中蛋白质、单宁等物质，减少树皮中营养成分对显色剂显色效果的影响，同时具有表面活性剂的作用，海藻酸钠聚合物和聚乙烯吡咯烷酮可起到稳定并促进检测试剂渗入进树皮的多层次组织结构，有利于检测试剂与树皮组织内部的HCN充分地作用。

一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂，以氯仿为溶剂，每20～25mL氯仿含有4,4'-二氨基二苯甲烷10～15g、乙酰乙酸乙酯铜10～15g、海藻酸钠聚合物2～5g和聚乙烯吡咯烷酮5～8g。

进一步说明，所述海藻酸钠聚合物的制备方法，包括如下步骤：

步骤Sa：取海藻酸钠，加入质量浓度0.25～0.30％的高碘酸钠溶液，避光搅拌1-2h，得反应液；

步骤Sb：反应液中加入质量浓度5～8％的氯化钙水溶液，搅拌50～60min，加入质量浓度4～6％的聚丙烯酸钠溶液，25～35℃超声乳化5～10min，得乳化液；