[发明专利]一种环状RNA原位检测方法在审
| 申请号： | 202110853547.6 | 申请日： | 2021-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN113564230A | 公开（公告）日： | 2021-10-29 |
| 发明（设计）人： | 林辰 | 申请（专利权）人： | 华侨大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6841 | 分类号： | C12Q1/6841;C12Q1/682 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;姜谧 |
| 地址： | 362000 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 环状 rna 原位 检测 方法 | ||
1.一种环状RNA原位检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)设计至少一锁式探针，该至少一锁式探针与待测样品中的待检测的环状RNA特异的杂交互补；
(2)通过能够以RNA为模板连接DNA的DNA连接酶将与上述环状RNA特异互补杂交的锁式探针沿所述环状RNA补齐核苷酸，获得至少一环形模板；
(3)以上述至少一环形模板为扩增模板，进行滚环扩增，获得至少一滚环扩增产物；
(4)将上述至少一滚环扩增产物与至少一检测探针杂交以进行环状RNA的原位检测。
2.如权利要求1所述的一种环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述待测样品为培养的细胞、组织中的细胞或组织切片中的细胞。
3.如权利要求2所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述待测样品为组织切片中的细胞。
4.如权利要求1所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述DNA连接酶为SplintR连接酶。
5.如权利要求1所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述滚环扩增所用的酶为phi29聚合酶。
6.如权利要求1所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述检测探针修饰有荧光标记物、显色标记物、酶标记物、放射性标记物、磁性标记物或发光密度标记物。
7.如权利要求1所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述至少一锁式探针含有自然和/或非自然核苷酸。
8.如权利要求1所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述待测样品为组织切片中的细胞，所述DNA连接酶为SplintR连接酶，所述滚环扩增所用的酶为phi29聚合酶。
9.如权利要求8所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述检测探针修饰有荧光标记物、显色标记物、酶标记物、放射性标记物、磁性标记物或发光密度标记物。
10.如权利要求9所述的环状RNA原位检测方法，其特征在于：所述至少一锁式探针含有自然和/或非自然核苷酸。
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