[发明专利]一种耐酸的和繁殖力强的干酪乳杆菌的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌的制备方法及其应用，属于微生物技术领域。本发明通过将干酪乳杆菌接种到加入了5’鸟苷酸二钠的MRS液体培养基中，在30‑37℃条件下培养10‑48h，获得耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌。所得的干酪乳杆菌生物被膜的产生及胞外聚合物的分泌增加，增强干酪乳杆菌对外界不利环境的抗性，从而增强细菌的存活率，本发明为提高干酪乳杆菌的存活率提供了一种新思路，并且扩展了干酪乳杆菌在食品和保健食品上的应用。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌的制备方法及其应用。

背景技术

益生菌是通过定殖在人体内，对人体健康有重要作用的活性微生物。研究发现，益生菌在调节肠道菌群平衡、促进营养吸收、保持肠道健康等方面具有重要的作用。但是益生菌在加工销售过程中以及通过消化道时容易失活，达不到其发挥功能的剂量，因此需要寻找合适的益生元物质来促进其生长繁殖或者增强其抵御外界不良环境的能力。

核苷酸是细胞的重要组成成分，是DNA和RNA的前体，在细胞的代谢、蛋白质合成和细胞分裂等过程中起到重要作用。此外，核苷酸在一些特定条件下，如疾病、快速生长发育、营养摄入受限以及内源性合成和表达受阻时，会使核苷酸成为机体的“必需营养素”。然而，将核苷酸用于制备耐酸的和繁殖能力强的益生菌的相关研究还未见报道。

发明内容

本发明针对上述问题，提供一种耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌的制备方法及其应用。基于群体感应系统研究外源核苷酸对干酪乳杆菌耐酸和繁殖能力的影响，并以干酪乳杆菌的LuxS蛋白为靶点，探究外源核苷酸的作用机制。

本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：

一种耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌的制备方法，主要包括以下步骤：

(1)将甘油保护剂中保存的干酪乳杆菌接入MRS液体培养基中活化后连续培养2代以上，获得干酪乳杆菌菌液；

(2)向MRS液体培养基加入5’鸟苷酸二钠，混合均匀后，接种步骤(1)获得的干酪乳杆菌菌液，于30-37℃条件下培养10-48h，即得耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌。

进一步地，步骤(1)中所述的活化过程为将保存干酪乳杆菌的冷冻管于30-37℃的水浴锅中快速溶解，使用75％酒精消毒后，加入到无菌的MRS液体培养基。

进一步地，步骤(1)中所述MRS液体培养基包含有葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母提取物、磷酸氢二钾、柠檬酸二铵、乙酸钠。

进一步地，步骤(1)中所述MRS液体培养基的灭菌条件为121℃条件下灭菌15min。

进一步地，步骤(2)中所述MRS液体培养基中的5’鸟苷酸二钠的浓度为1-4g/100mL。

进一步地，步骤(2)中的接种量为MRS液体培养基体积的1％。

进一步地，步骤(2)中的培养条件为37℃条件下摇床培养，摇床转速为50-200r/min。

本发明另一方面提供一种上述方法获得的耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌在食品或保健品中的应用。

进一步地，所述应用包括将所述耐酸的和繁殖能力强的干酪乳杆菌直接或经常规处理后添加到食品或保健品中。

进一步地，所述食品或保健品具有调节肠道菌群平衡、促进营养吸收、保持肠道健康、降血压、降胆固醇和提高免疫力的作用。

本发明相对于现有技术具有的有益效果如下：