[发明专利]基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针及应用

权利要求书

1.一种基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针，其特征在于，所述基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针的探针底物可被β-葡萄糖醛酸苷酶特异性催化，所述探针底物为4-甲基伞形酮-β-葡萄糖醛酸苷，所述探针中还含有Eu³⁺@MOF-253。

2.根据权利要求1所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针，其特征在于，所述探针中还含有酶激活剂，所述酶激活剂为二价钙离子盐。

3.根据权利要求2所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针，其特征在于，所述探针底物、酶激活剂、Eu³⁺@MOF-253的用量比为(50～800)nmol：(50～300)nmol：(50～300)mg。

4.根据权利要求1所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针，其特征在于，所述Eu³⁺@MOF-253的制备方法包括如下步骤：

步骤1)：将有机配体和金属铝盐溶解于第一有机溶剂中，加热至100～150摄氏度反应18～30h，冷却到15～35摄氏度，洗涤干燥，即得MOF-253；

步骤2)：将镧系离子金属盐和步骤1)得到的MOF-253加入第二有机溶剂中，加热回流反应18～30h，洗涤干燥，即得Eu³⁺@MOF-253。

5.根据权利要求4所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针，其特征在于，所述步骤1)中，有机配体为2，2’-联吡啶-5，5’-二羧酸；金属铝盐为氯化铝；第一有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺。

6.根据权利要求4所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针，其特征在于，所述步骤2)中，镧系离子金属盐为硝酸铕；第二有机溶剂为甲醇或乙醇。

7.一种权利要求1～3任一项所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针非诊断非治疗目的的应用，其特征在于，采用4-甲基伞形酮-β-葡萄糖醛酸苷作为β-葡萄糖醛酸苷酶的特异性底物，进行水解反应，通过测定水解产物4-甲基伞形酮与Eu³⁺@MOF-253的比率荧光和/或比率色度来检测生物体系中β-葡萄糖醛酸苷酶的活性。

8.根据权利要求7所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针非诊断非治疗目的的应用，其特征在于，体外孵育反应条件为底物浓度为2～3μM；孵育体系pH为5～6；反应温度为30～50摄氏度。

9.根据权利要求7所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针非诊断非治疗目的的应用，其特征在于，所述生物体系选自重组表达β-葡萄糖醛酸苷酶、细胞样品、人或动物组织、植物、微生物中的一种。

10.根据权利要求8所述的基于金属有机骨架的β-葡萄糖醛酸苷酶探针非诊断非治疗目的的应用，其特征在于，所述水解产物4-甲基伞形酮的激发波长为322nm，发射波长为450nm，Eu³⁺@MOF-253的激发波长为322nm，发射波长为617nm。