[发明专利]一种用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液在审
申请号: | 202110846550.5 | 申请日: | 2021-07-26 |
公开(公告)号: | CN113519504A | 公开(公告)日: | 2021-10-22 |
发明(设计)人: | 冷毅斌;吴亭;尚振波 | 申请(专利权)人: | 武汉普诺赛生命科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人: | 朱才永 |
地址: | 430000 湖北省武汉市武汉东湖新技术开发*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 直接 液氮 血清 蛋白 冻存液 | ||
1.一种用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,包括含有渗透保护剂、细胞膜保护剂和细胞稳定剂的PBS缓冲液和添加剂,所述PBS缓冲液中渗透保护剂的体积百分比为5~10%,细胞膜保护剂的质量体积比为1~3%,细胞稳定剂的质量体积比为1~6%;所述添加剂包括L-谷氨酰胺、谷丙二肽和丙酮酸钠。
2.根据权利要求1所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,所述L-谷氨酰胺的摩尔浓度为1~4mM,所述谷丙二肽的摩尔浓度为0.5~2mM,所述丙酮酸钠的摩尔浓度为0.5~2mM。
3.根据权利要求1所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,所述渗透保护剂为二甲基亚砜、甘油、乙酰胺、乙二醇中的一种。
4.根据权利要求1所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,所述细胞膜保护剂为海藻糖、蔗糖中的一种或两种。
5.根据权利要求1所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,所述细胞稳定剂为羟乙基淀粉、糖酐中的一种或两种。
6.根据权利要求5所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,所述糖酐为糖酐4万。
7.根据权利要求1~6任一项所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,所述冻存液还包括还原型谷胱甘肽,所述还原性谷胱甘肽的质量体积比为0.5~1%。
8.根据权利要求1所述的用于直接液氮冻存的无血清无蛋白冻存液,其特征在于,包括含有乙酰胺、海藻糖和羟乙基淀粉的PBS缓冲液和添加剂,所述PBS缓冲液中乙酰胺的体积百分比为5%,海藻糖的质量体积比为2.5%,羟乙基淀粉的质量体积比为3%;
所述添加剂包括L-谷氨酰胺、谷丙二肽、丙酮酸钠和还原型谷胱甘肽,所述L-谷氨酰胺的摩尔浓度为2mM,所述谷丙二肽的摩尔浓度为1mM,所述丙酮酸钠的摩尔浓度为1mM,所述还原性谷胱甘肽的质量体积比为0.8%。
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