[发明专利]一种戊糖片球菌368菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种戊糖片球菌Pediococcuspentosaceus368菌剂及其应用。本发明戊糖片球菌368菌剂，其特征在于：经过包括如下步骤的制备方法获得：(1)菌种制备：MRS液体培养基中接种戊糖片球菌368，32～38℃培养18～20h，8000～10000rpm离心获得菌体；(2)将菌体进行冷冻干燥。本发明戊糖片球菌368菌剂可在猪肠道内极显著抑制链球菌的生长，具有抗病能力，还能提高猪的平均日增重，平均日采食量，降低料重比，腹泻率和便秘率，降低粪便中铵氮和粗纤维的含量，降低铵氮污染，提高粗纤维的利用。

本申请是申请日为2020年07月21日、申请号为202010714586.3、发明名称为《一种戊糖片球菌368及其应用》的分案申请。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种戊糖片球菌368菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

乳酸菌通过代谢产物调节肠道pH，从而促进动物生长，调节肠道菌群结构和相对丰度，从而改善胃肠道功能、提高生长性能并降低发病率等。戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)属于链球菌科片球菌属，能发酵葡萄糖产生乳酸，能抑制嗜水气单胞菌、李斯特菌、蜡样芽孢杆菌等病原菌。但还未见对猪链球菌的抑制效果报告，且目前多数拮抗病原菌的试验在体外进行，在复杂的动物体内是否能发挥有效地抗菌效果还未见报道。

我国畜禽养殖过程中，存在抗生素的滥用、易造成环境污染、生物产品中抗生素的残留、动物肠道菌群平衡被打破等问题，甚至土壤环境恶化等一系列反应；戊糖片球菌具有良好的产酸和拮抗病原菌特性，并能促进营养物质代谢、吸收，可作为新型饲料添加剂。

目前，缺乏一株能降低猪的腹泻率和便秘率的戊糖片球菌368及其应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一株能降低猪的腹泻率和便秘率的戊糖片球菌368及其应用。

为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案实现：本发明的一种戊糖片球菌368，该菌株为戊糖片球菌Pediococcus pentosaceus；保藏名称为戊糖片球菌LL2018368；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研究所；保藏日期：2019年10月21日；保藏编号：CGMCC No：18709。

进一步地，所述的戊糖片球菌368的16S rDNA的基因序列为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

进一步地，在MRS培养基中，经过35℃，72h有氧培养后，菌落呈圆形、乳白色，表面光滑、中间隆起且边缘整齐，无色素沉着，容易挑起，无丝，有乳酸的香味，革兰氏染色为阳性，菌体为杆状，兼性厌氧，4℃液体保存可以存活两个月以上，最适生长温度30～38℃。

本发明所述的戊糖片球菌368制备的戊糖片球菌368菌剂。

本发明所述的戊糖片球菌368菌剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)菌种制备：MRS液体培养基中接种，32～38℃培养18～20h，8000～10000rpm离心获得菌体。

(2)将菌体进行冷冻干燥。

进一步地，在步骤(1)中，所述MRS培养基培养液为：蛋白胨10.0g；牛肉膏5.0g；酵母粉4.0g；葡萄糖20.0g；磷酸氢二钾2.0g；柠檬酸三铵2.0g；醋酸钠5.0g；硫酸镁0.2g；硫酸锰0.05g；吐温801.0mL；水1L。

本发明所述的戊糖片球菌368菌剂在饲料和水中的应用。

进一步地，所述微生物制剂中菌体的有效活菌数为10¹⁰～10¹¹CFU/g。