[发明专利]一种合成固定化脂肪酶及其应用于拆分3-苯基乳酸对映体新的方法

权利要求书

1.一种应用于手性对映体拆分的荧光假单胞菌脂肪酶的固定化方法，其特征在于所述的方法是通过共价键法把脂肪酶固定在NH₂-MIL-88B/Fe₃O₄上，并将该固定化酶用于酯交换拆分3-苯基乳酸对映体反应（式1），包含下述操作步骤：在合成固定化酶过程中，选择合适的酶溶液浓度，加入一定量的NH₂-MIL-88B/Fe₃O₄，在一定的温度、pH下振荡反应一定时间，反应结束后，过滤并冷冻干燥得到固定化酶；在以PFL@NH₂-MIL-88B/Fe₃O₄为催化剂，酯交换拆分3-苯基乳酸对映体的反应中，选择一种有机溶剂作为反应介质，加入一定量外消旋3-苯基乳酸和乙酸乙烯酯，再向反应管中投加一定量的固定化酶作为生物催化剂，在一定的温度下搅拌反应一定时间，待反应结束后，取一定体积的反应液进行稀释及分析检测；

式1. 脂肪酶催化拆分3-苯基乳酸对映体

其中，所述脂肪酶为荧光假单胞菌脂肪酶，有机溶剂为甲基叔丁基醚。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在合成固定化酶过程中，所述酶溶液浓度为2-20 mg/mL，NH₂-MIL-88B/Fe₃O₄的浓度为1-20 mg/mL，固定化反应体系pH为5.0-9.0，反应温度为5-65℃，反应时间为4-30 h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，拆分3-苯基乳酸对映体中，所述3-苯基乳酸的浓度为5-20 mmol/L，乙酸乙烯酯浓度为100-600 mmol/L，固定化酶的浓度为1-30 mg/mL，反应温度为30-75 ^oC，反应时间为1-30 h。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，固定化酶可重复利用，操作步骤为：反应结束后，过滤将固定化酶从反应介质中进行离心分离，固定化酶经冷冻干燥后重复使用。