[发明专利]一种用于鉴定金定鸭品种的SNP引物组合及鉴定方法有效
| 申请号: | 202110825381.7 | 申请日: | 2021-07-21 |
| 公开(公告)号: | CN113322334B | 公开(公告)日: | 2022-11-04 |
| 发明(设计)人: | 徐文娟;朱春红;李慧芳;宋卫涛;陶志云;刘宏祥;章双杰 | 申请(专利权)人: | 江苏省家禽科学研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11;G16B20/20 |
| 代理公司: | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人: | 刘瑜冬 |
| 地址: | 225125 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 鉴定 金定鸭 品种 snp 引物 组合 方法 | ||
1.一种用于鉴定金定鸭品种的SNP引物组合,其特征在于,所述引物组合可以扩增选自如下JD1P位点到JD7P位点中的任意3到7种:
JD1P位于NC_040047.1染色体上第127643061位,该位点核苷酸碱基为T或C;
JD2P位于NC_040048.1染色体上第112028426位,该位点核苷酸碱基为A或G;
JD3P位于NC_040052.1染色体上第440691位,该位点核苷酸碱基T或C;
JD4P位于NC_040053.1染色体上第3779408位,该位点核苷酸碱基C或T;
JD5P位于NC_040054.1染色体上第18797161位,该位点核苷酸碱基为T或C;
JD6P位于NC_040056.1染色体上第8694111位,该位点核苷酸碱基为T或C;
JD7P位于NC_040060.1染色体上第11540267位,该位点核苷酸碱基为G或A。
2.根据权利要求1所述的一种用于鉴定金定鸭品种的SNP引物组合,其特征在于,各SNP位点引物的序列为:
JD1F:5’CAGTCTGGAAAGAGGAAATGTGA3’
JD1R:5’ATTATACCTTTCTTGGCATTTTTA3’
JD2F:5’CAAGGGGGGATATGAGGTT3’
JD2R:5’GCAAGGCAGTCAAGGGAGC3’
JD3F:5’CCTGAATGGTGCTTTGTTTAC3’
JD3R:5’GCCTTCTGCCACTGCTGCTA3’
JD4F:5’TTCTGTCCCTTTTGCTCTTTG3’
JD4R:5’GCTGTTCTTCGGCATTCTCTT3’
JD5F:5’AGCCTTACGCTCTGCTTACAT3’
JD5R:5’ACTTCGCTTTTTTCTTTCCAT3’
JD6F:5’CAGAGAAGTGACCGGAGAAGA3’
JD6R:5’GGCAAAGTGGAGGTATGAGAA3’
JD7F:5’AATCTTCCAAGGATGGGGTCAAT3’
JD7R:5’TGATGAAAGCCAGGAGCAGAACT3’。
3.权利要求1或2任一项所述SNP引物组合在金定鸭品种鉴定中的应用。
4.一种金定鸭品种的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测鸭基因组总DNA;
(2)根据所选SNP组合,利用权利要求2对应的引物对分别进行PCR扩增;
(3)将PCR扩增产物测序后、判断基因型;
(4)根据基因型结果,判断个体是否属于金定鸭品种,如果所选SNP组合对应的基因型有一个不符合金定鸭对应的基因型,则判定该个体不属于金定鸭;如果所选SNP组合对应的基因型全部符合金定鸭对应的基因型,则根据贝叶斯定理判定该个体属于金定鸭的概率。
5.根据权利要求4所述的鉴定方法,其特征在于,所述步骤(1)中待测鸭的基因组DNA由该鸭种的个体翅静脉采血得到。
6.根据权利要求4所述的鉴定方法,其特征在于,所述金定鸭中7个SNP位点JD1P~JD7P的基因型依次为TT、AA、TT、CC、TT、TT、GG。
7.根据权利要求4所述的鉴定方法,其特征在于,所述贝叶斯定理计算公式如下:
其中,表示SNP组合中第个SNP中其他品种对应基因型的频率。
8.根据权利要求7所述的鉴定方法,其特征在于,所述SNP位点在金定鸭及其他品种中的基因型、基因型频率如下所示:
JD1P位点:当基因型为TT时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.2;当基因型为TC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.4124;当基因型为CC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.3876;
JD2P位点:当基因型为AA时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.1622;当基因型为AG时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.3083;当基因型为GG时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.5295;
JD3P位点:当基因型为TT时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.2067;当基因型为TC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.3367;当基因型为CC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.4567;
JD4P位点:当基因型为CC时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.26;当基因型为CT时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.38;当基因型为TT时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.36;
JD5P位点:当基因型为TT时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.14;当基因型为TC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.5;当基因型为CC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.36;
JD6P位点:当基因型为TT时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.2800;当基因型为TC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.2978;当基因型为CC时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.4222;
JD7P位点:当基因型为GG时,金定鸭的基因型频率为1,其他品种的基因型频率为0.2711;当基因型为GA时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.2622;当基因型为AA时,金定鸭的基因型频率为0,其他品种的基因型频率为0.4667。
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