[发明专利]同型半胱氨酸检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明涉及一种利用化学发光免疫分析技术的同型半胱氨酸检测试剂盒，同时本发明还涉及测定同型半胱氨酸浓度的方法、试剂的组成及成分，属于医学检验测定技术领域。本发明的试剂盒主要包括：样品处理液、化学发光标记物标记的S‑腺苷‑高半胱氨酸单克隆抗体、包被在固定载体上的S‑腺苷‑高半胱氨酸、浓缩洗涤液、发光液以及反应管；加入待测样本温育5～10min即完成样品初处理；可通过检测平台进行实验，机器加样会确保每个待测样本添加的试剂剂量、添加顺序，添加试剂间时差保持一致，可提高检测的重复性；采用化学发光免疫方法进行检测，本品具有更高的灵敏度、准确性，特异性、稳定性，与其他检测方法检验结果相符合。

技术领域

本发明涉及一种同型半胱氨酸检测试剂盒，同时本发明还涉及测定同型半胱氨酸浓度的方法，属于医学检验测定技术领域。

背景技术

同型半胱氨酸是一种含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的重要中间产物，正常情况下，同型半胱氨酸在体内被代谢分解，浓度维持在较低水平，但当同型半胱氨酸浓度处于较高水平时，冠心病、外周血管疾病及脑血管疾病的发病风险会大幅增加。

测定血液中同型半胱氨酸的方法有很多种，包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱(GC-MS)联用法、荧光偏振免疫法(FPLA)、酶联免疫分析法(ELISA)及酶法等。高效液相色谱、气相色谱-质谱联用等理化检测方法需要用专业仪器进行操作，分析成本高、日常维护费用昂贵，前处理过程复杂且分析时间长；酶联免疫方法等免疫方法的样品需要提前进行处理，前处理手续繁杂费时，机器难以处理，一般采用人工操作，人工操作会带来操作过程中的失误和误差，包括操作方法不正确、试剂添加的顺序错误、遗漏步骤、加样之间的时差都会对结果产生影响，检测的稳定性和重复性差，并且检测的特异性和灵敏性也较欠缺；酶法是应市场要求发展出的新检验方法，检测同型半胱氨酸通常使用生化循环酶法，生化循环酶法受环境如温度、pH值等影响较大，检测的灵敏度和准确度低。

发明内容

本发现的目的在于提供一种利用化学发光免疫分析技术的同型半胱氨酸检测试剂盒及其检测方法，本品在试剂中加入样品处理液，对待测生物样品进行简单的样品处理即可用于后续检测。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：一种同型半胱氨酸检测试剂盒，包括样品处理液、化学发光标记物标记的S-腺苷-高半胱氨酸单克隆抗体、包被在固定载体上的S-腺苷-高半胱氨酸、浓缩洗涤液、发光液以及反应管；

所述样品处理液包括样品处理液A和样品处理液B；

所述样品处理液A含有浓度为0.001～10mg/mL的S-腺苷-高半胱氨酸水解酶和25～500mM的三羟甲基氨基甲烷缓冲液；所述样品处理液B为含0.1～1.2mg/mL的巯基还原剂的缓冲液。

进一步地，所述巯基还原剂为二硫苏糖醇、β-巯基乙醇、三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐中的一种或多种。

进一步地，所述发光液包括发光液A液和发光液B液，所述发光液A液为过氧化氢和硝酸的混合液；发光液B液为氢氧化钠溶液。

进一步地，所述化学发光标记物标记的S-腺苷-高半胱氨酸单克隆抗体中化学发光标记物为吖啶酯。

进一步地，所述包被在固定载体上的S-腺苷-高半胱氨酸为包被在磁珠上的S-腺苷-高半胱氨酸。

进一步地，所述样品处理液A和样品处理液B内还含有防腐剂，所述防腐剂为硫柳汞、PC-300或叠氮化钠中的一种或多种。

进一步地，所述样品处理液A、样品处理液B、化学发光标记物标记的S-腺苷-高半胱氨酸单克隆抗体、包被在固定载体上的S-腺苷-高半胱氨酸、发光液A液、发光液B液、浓缩洗涤液均组成单剂试剂。

本发明还提供一种同型半胱氨酸的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：