[发明专利]一种类孟买血型FUT1 236delG等位基因及其检测方法和应用

权利要求书

1.一种类孟买血型FUT1236delG等位基因，其特征在于，所述类孟买血型FUT1 236delG等位基因为Hh血型系统变异型FUT1基因编码区域由起始密码子第236位碱基缺失了1个G。

2.权利要求1所述类孟买血型FUT1 236delG等位基因在制备用于检测类孟买血型的制品中的应用。

3.一种用于检测红细胞类孟买血型的引物对，其特征在于，所述的引物对的序列如SEQID NO:1-SEQ ID NO:3所示，其中，针对所述类孟买血型FUT1基因236delG等位基因的引物序列如SEQ ID NO:1所示和SEQ ID NO:2所示，针对野生型FUT1基因的引物序列如SEQ IDNO:3和SEQ ID NO:2所示，

4.一种用于检测红细胞类孟买血型的制品，其特征在于，所述制品是用于检测待检测的样品是否存权利要求1所述的类孟买血型FUT1 236delG等位基因。

5.根据权利要求4所述的一种用于检测红细胞类孟买血型的制品，其特征在于，所述制品包括PCR扩增测序检测试剂盒，所述PCR扩增测序检测试剂盒包括权利要求3所述的引物对。

6.根据权利要求5所述的一种用于检测红细胞类孟买血型的制品，其特征在于，所述PCR扩增测序检测试剂盒还包括2×Taq PCR MasterMix和内参引物对。

7.一种类孟买血型FUT1236delG等位基因的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：通过基因扩增方法对包含突变位点的目的片段进行选择性扩增，由此检测该突变基因的有无，检测方法包括以下步骤：

提取待检样本中的基因组DNA；

以所述基因组DNA为模板，采用用于检测红细胞类孟买血型的引物对进行PCR反应，得到PCR反应产物；

利用凝胶电泳法检测所述PCR反应产物的条带格局；

根据所述条带格局判断被检样本是否携带236delG等位基因，并鉴别纯合型或杂合型。

8.根据权利要求7所述的一种类孟买血型FUT1236delG等位基因的检测方法，其特征在于，所述根据所述条带格局判断被检样本是否携带236delG等位基因，并鉴别纯合型或杂合型，具体包括：

若待检测样本的所述条带格局为：没有236delG特异性扩增产物条带，表明待检测样本为非携带者；

若待检测样本的所述条带格局为：有236delG特异性扩增产物条带，表明待检测样本为236delG等位基因携带者；进一步判断236delG等位基因携带者为纯合型或杂合型，包括：

若待检测样本的所述条带格局为：既有236delG特异性扩增产物条带又有440wild特异性扩增产物条带，表明待检测样本为杂合型236delG等位基因携带者；

若待检测样本的所述条带格局为：只有236delG特异性扩增产物条带而没有440wild特异性扩增产物条带，表明待检测样本为纯合型236delG等位基因携带者。

9.根据权利要求7所述类孟买血型FUT1236delG等位基因的检测方法，其特征在于，所述用于检测红细胞类孟买血型的引物对如权利要求3所示，所述236delG特异性扩增产物条带和所述440wild特异性扩增产物条带的长度均为250bp；

同时引入1对管家基因β-actin引物作为DNA样本扩增阳性内参照，所述内参基因引物对的序列如SEQ ID NO:4-NO:5所示，所述内参照扩增产物片段长度为200bp。

10.根据权利要求7所述类孟买血型FUT1236delG等位基因的检测方法，其特征在于，所述236delG等位基因/野生型基因扩增的反应体系总体积10μL，包括DNA模板50ng，正反向引物终浓度各为0.4μM，2×Taq PCR MasterMix 5ul；

所述PCR扩增的条件：95℃预变性2min；95℃变性30s，66℃退火30s，72℃延伸30s，循环35次；最后72℃延伸10min，冷却至4℃。