[发明专利]一种定量分析血浆中氨来占诺的血药浓度的检测方法

说明书

本发明公开了一种定量分析血浆中氨来占诺的血药浓度的检测方法，所述检测方法是利用从经氨来占诺灌胃处理后的Wistar大鼠眼眶取血后，离心获取血浆，与含内标的乙腈溶液混合后，利用液质联用系统，以液相色谱作为分离系统对所述检测血浆样品进行分离，以质谱作为检测系统对梯度洗脱后的检测血浆样品进行检测，定量分析的离子分别为氨来占诺：m/z 299.2→281.2，内标IS:m/z 259.9→116.1，氨来占诺碰撞能量为19 V，内标碰撞能量为15 V。本发明具有专属性强，灵敏度高，样品预处理简单、快速，分析周期短等优点，适用于血浆中氨来占诺的血药浓度测定和药代动力学研究及组织分布研究。

技术领域

本发明涉及药物动力学和血药浓度监测应用领域，具体涉及一种定量分析血浆中氨来占诺的血药浓度的检测方法。

背景技术

氨来占诺(又称AA-673)，是一种新型的抗炎和抗过敏药物，在临床上已广泛用于治疗溃疡、哮喘和变应性鼻炎，其结构式如下：

近年来，氨来占诺在治疗非酒精性脂肪肝和肝炎病毒感染所致疾病方面也受到了广泛的关注。有研究者曾使用C¹⁴放射性同位素标记法和薄层色谱分析方法来检测氨来占诺在生物样品中的浓度(T.Hiroshi,Y.Kiyoshi,T.Tsuyoshi,D.Takayoshi,M.Masayoshi,N.Ichiro,T.Shigeharu,Metabolic fate of amoxanox(AA-673),a new antiallergicagent,in rats,mice,guinea pigs and dogs.Pharmacol.Ther.13(1985),4933–4954)，或者使用HPLC-UV方法检测氨来占诺滴眼液滴眼后在大鼠球结膜中氨来占诺的浓度(G.Rankov,K.Sasaki,M.Fukuda,Pharmacodynamics of Amlexanox(AA-673)in normaland anaphylactic rat conjunctiva and its effect on histamine concentration,Ophthalmic Res.22(1990)359–364)。HPLC法检测血浆样品需酸化血浆样品，采用乙酸乙酯提取，吹干溶剂后，流动相复溶。这些检测方法处理样品不仅复杂且灵敏度低，并不有利于氨来占诺的药代动力学的研究和分析。

近年来，液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法在生物样品分析中得到了广泛的应用。为了能有效开展氨来占诺在体内的吸收、分布、代谢、排泄有关特征的动物和人体的药代动力学研究，有必要建立一种能够定量分析且灵敏、快速的氨来占诺血药浓度的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种预处理简单、快速、血浆用量少、专属性强、准确度高、重现性好、分析时间短、可得到满意峰形及色谱保留时间的定量分析血浆中氨来占诺的血药浓度的检测方法。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了一种定量分析血浆中氨来占诺的血药浓度的检测方法，所述检测方法的具体包括以下步骤：

(1)血浆样品处理：采集给予氨来占诺处理后的血液样本，高速离心获取血浆样品，加入含内标的乙腈溶液，经涡旋混匀、高速离心后取上清液，得到检测血浆样品；

(2)采用液质联用系统进行检测血浆样品测定：以液相色谱作为分离系统对所述检测血浆样品进行分离，流动相采用含甲酸的乙腈-甲酸水的混合液，梯度洗脱；以质谱作为检测系统对梯度洗脱后的检测血浆样品进行检测，采用离子源为ESI离子源，多级反应监测MRM模式进行正离子检测，定量分析的离子分别为氨来占诺：m/z 299.2→281.2，内标IS:m/z 259.9→116.1，氨来占诺碰撞能量为19V，内标碰撞能量为15V。