[发明专利]一种药物中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定方法

说明书

本申请提供一种药物中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定方法，属于利用吸附作用、吸收作用、离子交换或类似现象来测试或分析材料化学或物理性质技术领域。以含溴甲烷的药物作为待测试样，将待测试样采用溶剂溶解，形成供试品溶液；采用顶空气相色谱‑氢火焰离子化检测法测定，溴甲烷浓度c与色谱图中溴甲烷峰面积A之间满足：A=190.18c‑0.7152。将本申请应用于克拉霉素等药物中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定，平均回收率为95.7％，RSD为5.0％，该方法准确、灵敏、可靠，可用于克拉霉素原料药中基因毒性杂质溴甲烷残留量的测定。

技术领域

本申请涉及一种药物(如：克拉霉素)中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定方法，属于利用吸附作用、吸收作用、离子交换或类似现象来测试或分析材料化学或物理性质技术领域。

背景技术

克拉霉素是一种半合成的红霉素衍生物，在临床上具有重要价值，被认为是目前最安全有效的广谱抗生素之一。根据其合成工艺路线，在克拉霉素肟甲化物合成的过程中用到了溴甲烷。溴甲烷作为一种典型的卤代烷烃类化合物，在药物合成过程中常作为一种优良的甲基化试剂参与反应。但由于卤代烷烃具有遗传毒性杂质警示结构，因此有必要对克拉霉素中溴甲烷残留量进行控制。

王永春采用顶空气相色谱法结合微池电子捕获器(μ-ECD)检测法测定食品中溴甲烷，最低检测限可达0.01ppm；杨桂朋等采用吹扫-捕集-气相色谱配电导检测器(GC-ECD)法测定海水中氯甲烷与溴甲烷；翟自然等采用顶空气相色谱-氢火焰离子化检测(GC-FID)法测定合成富马酸贝达喹啉的起始物料中的基因毒性杂质1-氯丙烷和2-氯丙烷。而关于克拉霉素中溴甲烷的测定还未见报道。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种药物(如：克拉霉素)中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定方法。

具体地，本申请是通过以下方案实现的：

一种药物中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定方法，包括以下步骤：

(1)以含溴甲烷的药物作为待测试样，将待测试样采用溶剂溶解，形成供试品溶液；

(2)供试品溶液采用顶空气相色谱-氢火焰离子化检测法测定，其中，

顶空条件：平衡温度70～100℃，平衡时间5～30min，顶空瓶中液体体积1～5ml，

色谱条件：选择DB-WAX毛细管柱、Rtx-624毛细管柱、DB-1701毛细管柱中的任一种作为色谱柱，色谱柱程序升温如下：初始温度40℃，维持5分钟，再以20℃/分钟的速度升温至220℃，维持1分钟，GC运行时间15分钟，得色谱图；

(3)溴甲烷浓度c与色谱图中溴甲烷峰面积A之间满足：A＝190.18c-0.7152。

上述方法用于药物中遗传毒性杂质溴甲烷残留量的测定，具有准确、灵敏、可靠等优点，最低检测限可达到6.9ng/ml，相当于样品浓度0.07μg/g，平均回收率为95.7％，相对标准偏差RSD为5.0％。

进一步的，作为优选：

上述测定方法中，供试品溶液中，溴甲烷浓度c为0.023～0.375μg/ml。

上述测定方法中，所述供试品溶液包括空白供试品溶液和加标供试品溶液，所述空白供试品溶液由含溴甲烷药物溶解在溶剂中得到，加标供试品溶液由含溴甲烷药物与对照品溶液混合得到，对照品溶液是溴甲烷标准溶液加入溶剂稀释得到，对照品浓度为0.023-0.375μg/ml。

更优选的：

所述空白供试品溶液的质量浓度为0.1g/ml。

所述对照品溶液的浓度为0.023、0.050、0.100、0.150、0.250、0.375μg/ml中的任一种。