[发明专利]一种卡泊三醇软膏中前卡泊三醇、杂质C和杂质D的检测方法

说明书

本发明公开了一种卡泊三醇软膏中前卡泊三醇、杂质C和杂质D的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱仪进行检测，且所述方法包括如下步骤：（1）溶液的配制：配制供试品溶液；根据所述的供试品溶液，使用流动相A和流动相B的混合液对其进行稀释，制得对照品溶液；（2）量取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图；（3）取杂质C、杂质D和卡泊三醇对照品适量，用流动相溶解并稀释，摇匀，作为系统适用性溶液；（4）量取系统适用性溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。本发明的方法精密度较好，结果准确灵敏、可靠，适用范围广；同时，本发明的方法简单易行，成本低，适合推广使用。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别涉及一种卡泊三醇软膏中前卡泊三醇、杂质C和杂质D的检测方法。

背景技术

银屑病是一种发病率较高的自身免疫疾病，俗称“牛皮癣”。其病症主要为表皮增殖和炎症，特点是角质形成细胞的增殖和分化加速，原位自身反应性T细胞增加以及血管生成和扩张。银屑病表皮处于过度增殖状态，皮肤表皮的动态平衡以加速的方式维持。银屑病表皮的增殖速率是正常表皮的30倍。由于表皮基底层的细胞密度增大，当密度超过一定阈值时，具有快速增殖能力的短暂扩增细胞被向外推移，从而引发增殖层扩大和真皮乳头的加深，真皮乳头的伸缩使基底层细胞产生强的收缩力，这种作用进一步将分化的细胞和短暂扩增细胞推出基底层，使之失去与真皮的连接而迅速角质化。在这种作用下，银屑病表皮的角质化现象加速，表皮的更新时间也显著缩短。银屑病主要分为四种类型：寻常型、脓疱型、关节病型以及红皮病型。其中寻常型银屑病发病率最高，约占整个患病人群的85～90％。

卡泊三醇是一种维生素D3衍生物，对1,25-(OH)2-D3受体有较强的亲合力，具有抑制角质形成细胞增殖和促进角质形成细胞分化成熟及抑制炎症反应等药理作用。

研究发现，卡泊三醇会降解产生杂质C、杂质D，卡泊三醇在溶液中会部分转化成前卡泊三醇(卡泊三醇和前卡泊三醇均作为药物活性成分)，化学结构式分别如下：

杂质C：

杂质D：

前卡泊三醇：

目前卡泊三醇软膏已在国内上市，已被英国药典和和美国药典收录，尚未被中国药典收录。药典正文中检查项下有对杂质C和杂质D进行控制，但是均未提及前卡泊三醇以及考察其与杂质C、杂质D的有效分离。

发明内容

本发明的目的是提供一种卡泊三醇软膏中前卡泊三醇、杂质C和杂质D的检测方法，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。

本发明提供的一种卡泊三醇软膏中前卡泊三醇、杂质C和杂质D的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱仪进行检测，且所述方法包括如下步骤：

(1)溶液的配制：配制供试品溶液；根据所述的供试品溶液，使用流动相A和流动相B的混合液对其进行稀释，制得对照品溶液；

(2)量取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图；

(3)取杂质C、杂质D和卡泊三醇对照品适量，用流动相溶解并稀释，摇匀，作为系统适用性溶液；

(4)量取系统适用性溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。

其中：相邻色谱峰之间的分离度应不小于1.5。

在某些实施方案中，步骤(1)中供试品溶液的配制方法为：将卡泊三醇软膏溶于流动相A和流动相B的混合液中，加入正庚烷后振摇静置分层，取下层溶液进行过滤，进而得到所述供试品溶液。