[发明专利]一种单人份血浆中组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体测定试剂盒及检测方法

说明书

本发明提供了一种单人份血浆中组织型纤溶酶原激活剂‑抑制剂1复合体测定试剂盒及检测方法。该试剂盒检测速度快、灵敏度高、特异性能好、变异系数小，各试剂组分稳定性良好。一种单人份血浆中组织型纤溶酶原激活剂‑抑制剂1复合体测定试剂盒，其特征在于：包括试剂条，所述试剂条包括3个以上的试剂孔位，所述试剂条的其中两个试剂孔位封装有试剂一和试剂二、其中一个试剂孔位由链霉亲和素包被；试剂一为浓度2.6μg/mL的生物素标记的组织型纤溶酶原激活剂‑抑制剂1复合体抗体溶液，试剂二为浓度0.24μg/mL的辣根过氧化物酶标记的组织型纤溶酶原激活剂‑抑制剂1复合体抗体的溶液。

技术领域

本发明属于医疗器械类体外诊断领域，具体涉及一种单人份血浆中组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体测定试剂盒及检测方法。

背景技术

组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体（tPAI·C），是在人体内广泛存在的调节机体纤溶过程和凝血过程的重要因子。它是由组织型纤溶酶原激活剂（tissue-plasminogen activator，tPA）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activatorinhibitor-1，PAI-1）结合而形成的复合物。

组织型纤溶酶原激活剂是一种单链糖蛋白，主要由血管内皮细胞合成并分泌，其对于纤维蛋白具有较高的亲和力，可将酪氨酸纤溶酶原转化成纤溶酶，从而达到降解部分凝血因子以及纤维蛋白的作用，还可解聚团块血小板，从而保证正常血管畅通和阻塞血管再通，是纤溶系统重要的关键调节物质。血浆纤溶酶原激活抑制剂（PAI）分为PAI-1和PAI-2，其中在调节血浆纤溶活性方面起重要作用的是PAI-1，PAI-1是一种单链糖蛋白，属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族，其是组织型纤溶酶原激活物（tPA）和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）的主要抑制剂，并且在功能上用于抑制组织和血浆纤维蛋白的溶解。

当机体凝血活化时，纤维蛋白形成后可以激活合成于血管内皮细胞的组织型纤溶酶原激活剂（tPA），活化的tPA进一步激活纤溶酶原转化为纤溶酶，纤溶酶降解纤维蛋白产生降解产物，随后PAI-1与tPA以1:1的比例结合形成复合物tPAI-C，tPA激活纤溶酶原的活性被抑制，进而抑制纤维蛋白降解。血浆中PAI-1浓度为tPA浓度的5倍，因此可认为释放到血液中的tPA几乎都与PAI-1形成了复合物。tPAI-C的水平与tPA浓度及血管内皮损伤程度呈正相关，是评估两者的直接标志物。

tPAI-C对于DIC、动静脉血栓均有提示作用，是静脉血栓栓塞症（VTE）以及心梗的风险指标，其血浆水平的升高提示DIC的可能、血管内皮细胞损伤、血栓的形成，其对于DIC的诊断具有重要价值。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种单人份血浆中组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体测定试剂盒；第二，本发明还提供了适用该试剂的检测方法；第三，本发明引入了一种新的设计，将试剂装在特殊的试剂条中，实现单人份检测的要求，试剂条的设计。该试剂盒用于定量测定血浆中的组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体的浓度。

试剂组成及成分：

一种单人份血浆中组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体测定试剂盒，其特征在于：包括试剂条，所述试剂条包括3个以上的试剂孔位，所述试剂条的其中两个试剂孔位封装有试剂一和试剂二、其中一个试剂孔位由链霉亲和素包被；

试剂一为浓度2.6μg/mL的生物素标记的组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体抗体溶液，生产抗体的单克隆细胞株来自江苏拜明生物技术有限公司，单克隆细胞株号TPAIC25E9；

试剂二为浓度0.24μg/mL的辣根过氧化物酶标记的组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合体抗体的溶液，生产抗体的单克隆细胞株来自江苏拜明生物技术有限公司，单克隆细胞株号TPAIC17F10；

所述测定试剂盒还包括洗液、校准品、底物溶液；

所述洗液为pH 7.5，含1%吐温-20、0.1%Proclin300、0.05M的Tris-HCl溶液；