[发明专利]石斛质量、多糖检测和定位物质在细胞具体位置的方法

说明书

石斛质量、多糖检测和定位物质在细胞具体位置的方法。本发明公开了一种石斛质量检测方法，采集细胞质和淀粉粒拉曼图谱各若干个；进一步对所述若干个细胞质和淀粉粒拉曼的图谱进行基线校准和面积归一化处理，得到单一的细胞质拉曼图谱、淀粉粒拉曼图谱和细胞壁拉曼图谱；在所述单一的细胞质拉曼图谱和淀粉粒拉曼图谱中确定有差异的峰位；对所述细胞质拉曼图谱和淀粉粒拉曼图谱使用夹峰法进行拉曼成像，最后通过计算得出细胞质和淀粉粒的多糖含量。本发明的有益效果：实现成分无损耗，可以快速、精准反映多糖有效成分含量并定位有效成分位置。

技术领域

中药材多糖检测领域，尤其涉及一种操作简单、无标记、快速检测石斛多糖含量的方法。

背景技术

铁皮石斛是历代本草及中国药典明确记载的名贵药用植物之一，多糖是其发挥药理学作 用的主要物质基础，决定石斛质量的主要成分因素就是石斛多糖的含量，现有多糖的测定方 法有很多种，如斐林法、蒽酮-硫酸法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、酶法和苯酚-硫酸 法等，上述方法的缺点：需要提取纯化，检测过程耗时，物质容易损耗，导致检测结果不准 确，无法通过较为准确的数据判断石斛多糖的含量，进一步的无法控制石斛的质量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种石斛多糖和石斛细胞物质的检测方法，实现物 质无损耗，同时可以快速、精准反映有效成分含量，并快速定位有效成分在细胞中的具体位 置的方法。

为解决上述问题，本发明的技术方案是，

一种石斛质量的检测方法，其特征在于，包括，

采集若干待测石斛的细胞质和淀粉粒的拉曼图谱，获得，每一个所述石斛的多糖拉曼图 谱位移峰峰强；

比较所述石斛多糖拉曼图谱的位移峰峰强，所述位移峰峰强越高，多糖含量越多，则石 斛质量越好。

一种石斛多糖的检测方法，其特征在于，包括，

取石斛茎制作石斛切片；

将所述石斛切片放置在镀铝玻璃载玻片上，盖上盖玻片；

使用共聚焦显微拉曼光谱仪，选择532nm激光器；

在50-100倍物镜下找到细胞质和淀粉粒，设置好采集参数后进行拉曼图谱采集；

采集细胞质和淀粉粒拉曼图谱各若干个；

对所述若干个细胞质和淀粉粒拉曼的图谱进行基线校准和面积归一化处理，得到单一的 细胞质拉曼图谱和淀粉拉曼图谱；

在所述单一的细胞质拉曼图谱和淀粉粒拉曼图谱中确定多糖的峰位；

根据测得的所述多糖的峰位数据直接计算出所述石斛的多糖含量。

一种定位物质在细胞具体位置的方法，其特征在于，包括，

取石斛茎制作石斛切片；

将所述石斛切片放置在镀铝玻璃载玻片上，盖上盖玻片；

使用共聚焦显微拉曼光谱仪，选择532nm激光器；

在50-100倍物镜下找到细胞质和淀粉粒，设置好采集参数后进行拉曼单一光谱采集；

采集细胞质和淀粉粒拉曼图谱各若干个；

对所述若干个细胞质和淀粉粒拉曼的图谱进行基线校准和面积归一化处理，得到单一的 细胞质拉曼图谱和淀粉粒拉曼图谱；

在所述单一的细胞质拉曼图谱和淀粉粒拉曼图谱中确定若干物质对应的峰位；

对所述细胞质拉曼图谱和淀粉粒拉曼图谱使用夹峰法进行拉曼成像，显示出具体物质在 细胞中的具体位置。