[发明专利]一种高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌、构建方法及其应用在审
| 申请号： | 202110793222.3 | 申请日： | 2021-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN113528414A | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 李迅;张昕怡;王询;王飞 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 康伟 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高产 顺式 冷杉 重组 大肠杆菌 构建 方法 及其 应用 | ||
1.一种高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌，其特征在于：同时表达激酶基因ScCK、MtIPK或SfPhoN、MtIPK以及萜类前体合成基因IDI、Erg20。
2.如权利要求1所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌，其特征在于：所述ScCK基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述SfPhoN基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述MtIPK基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
3.如权利要求1或2所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌，其特征在于：所述重组大肠杆菌中敲除了磷酸酶基因aphA和yqaB。
4.如权利要求3所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌，其特征在于：所述aphA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述yqaB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.如权利要求1、2、4中任一项所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌，其特征在于：所述重组大肠杆菌以E.coliBL21(DE3)为出发菌株。
6.如权利要求1～5中任一项所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：包括，
构建含有激酶基因ScCK、MtIPK或SfPhoN、MtIPK以及萜类前体合成基因IDI、Erg20的第一重组质粒；
将所述第一重组质粒和重组质粒pGSC转化入大肠杆菌菌株中，获得大肠杆菌基因工程菌。
7.如权利要求6所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：还包括，
构建含有激酶基因ScCK或SfPhoN的第二重组质粒；
将第二重组质粒转化入所述大肠杆菌基因工程菌中。
8.如权利要求7所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：还包括，
敲除大肠杆菌基因组中的磷酸酶基因aphA和yqaB，获得突变型大肠杆菌菌株；
将所述第一重组质粒、所述第二重组质粒以及重组质粒pGSC转化入所述突变型大肠杆菌菌株中。
9.如权利要求8所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：所述第一重组质粒，以pRSFDuet-1为载体，构建含有激酶基因ScCK、MtIPK以及萜类前体合成基因IDI、Erg20的重组质粒pRSFDuet-ScCK-MtIPK-IDI-Erg20；
所述第二重组质粒，以pCDFDuet-1为载体，构建含有激酶基因SfPhoN的重组质粒pCDFDuet-SfPhoN。
10.如权利要求1～5中任一所述的高产顺式-冷杉醇的重组大肠杆菌在发酵生产顺式-冷杉醇中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京林业大学，未经南京林业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110793222.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：微处理器和分支处理方法
- 下一篇：基于粒子群算法的私家车位分配优化方法
